荧光分析法练习题

一、 A型题

1.若需测定生物试样中的微量氨基酸应选用下述哪种分析方法（ ）。 A、荧光光度法 B、磷光光度法 C、化学发光法 D、X荧光光谱法 E、原子荧光光谱法 答案：A

2.分子荧光分析比紫外-可见分光光度法选择性高的原因是（ ）。 A、分子荧光光谱为线状光谱，而分子吸收光谱为带状光谱 B、能发射荧光的物质比较少 C、荧光波长比相应的吸收波长稍长

D、荧光光度计有两个单色器，可以更好地消除组分间的相互干扰 E、分子荧光分析线性范围更宽 答案：B

3荧光量子效率是指（ ）。 A、荧光强度与吸收光强度之比

B、发射荧光的量子数与吸收激发光的量子数之比 C、发射荧光的分子数与物质的总分子数之比 D、激发态的分子数与基态的分子数之比 E、物质的总分子数与吸收激发光的分子数之比 答案：B

4.激发光波长和强度固定后，荧光强度与荧光波长的关系曲线称为（ A、吸收光谱 B、激发光谱

。1

） C、荧光光谱 D、工作曲线 E、标准工作曲线 答案：C

5.荧光波长固定后，荧光强度与激发光波长的关系曲线称为（ ）。 A、吸收光谱 B、激发光谱 C、荧光光谱 D、工作曲线 E、标准工作曲线 答案：B

6.一种物质能否发出荧光主要取决于（A、分子结构 B、激发光的波长 C、温度 D、溶剂的极性 E、激发光的强度 答案：A

7.下列结构中荧光效率最高的物质是（A、苯酚 B、苯 C、硝基苯 D、苯甲酸 E、碘苯 答案：A

。 。 2

） ）8.下列因素会导致荧光效率下降的有（ ）。 A、激发光强度下降 B、溶剂极性变小 C、温度下降

D、溶剂中含有卤素离子 E、激发光强度增大 答案：D

9.为使荧光强度和荧光物质溶液的浓度成正比，必须使（A、激发光足够强 B、吸光系数足够大 C、试液浓度足够稀 D、仪器灵敏度足够高 E、仪器选择性足够好 答案：C

10.在测定物质的荧光强度时，荧光标准溶液的作用是（ A、用做调整仪器的零点 B、用做参比溶液 C、用做定量标准 D、用做荧光测定的标度 E、以上都不是 答案：D

11.荧光分光光度计与分光光度计的主要区别在于（ A、光源 B、光路 C、单色器 D、检测器

）。 ）。。 3

）E、吸收池 答案：B

12.激发态分子经过振动弛豫回到第一电子激发态的最低振动能级后，经系间窜越转移至激发三重态，再经过振动弛豫降至三重态的最低振动能级，然后发出光辐射跃迁至基态的各个振动能级，这种光辐射称为（ ）。 A、分子荧光 B、分子磷光 C、瑞利散射光 D、拉曼散射光 E、原字荧光 答案：B

13.荧光分光光度计常用的光源是（ ）。 A、空心阴极灯 B、氙灯 C、氚灯 D、硅碳棒 E、钨灯 答案：B

14.采用激光作为荧光光度计的光源，其优点是（ A、可以有效消除散射光对荧光测定的干扰 B、可以提高荧光法的选择性 C、可以提高荧光法的灵敏度 D、可以避免荧光熄灭现象的产生 E、可以提高荧光法的发光效率 答案：C

。 4

）15.时间分辨荧光分析法选择性较好，是由于不同荧光物质的哪种性质不同？（ ）。 A、荧光强度 B、最大激发光波长 C、最大荧光波长 D、荧光寿命 E、入射光强 答案：D

16.下面分析方法不属于分子发射光谱法。（ ）。 A、 紫外-可见分光光度法 B、 荧光分析法 C、 磷光分析法 D、 化学发光分析法 E、生物发光分析法 答案：A

17.Which factor has no effect on the fluorescence quantum yield molecule?( A、 molecular structure B、 the presence of heavy atoms C、 the concentration of the solution D、 the temperature of solution E、 none 答案：C

二、 X型题

1.下列关于分子荧光分析特点的叙述正确的是（ ）。 A、检测灵敏度高 B、用量大，分析时间长

) 5

C、用量少，操作简便 D、选择性强 E、应用广泛 答案：ACD

2.列关于激发单重态与激发三重态性质叙述正确的有（ ）。 A、激发单重态分子是抗磁性分子，而激发三重态分子则是顺磁性的B、激发单重态的平均寿命要长于三重激发态

C、基态单重态到激发单重态的激发容易发生，为允许跃迁 D、激发三重态的能量比激发单重态的能量低 E、激发三重态的能量比激发单重态的能量高 答案：ACD

3.下列跃迁方式属于无辐射跃迁的有（ ）。 A、振动弛豫 B、内转换 C、系间跨越 D、猝灭 E、磷光发射 答案：ABCD

4.Which of the following group can enhance fluorescence intensity（ A、—OH B、—NH2 C、—COOH D、—NO2 E、—NO 答案：AB

. 6

）5.下列说法正确的有（ ）。 A、荧光波长一般比激发波长要长

B、分子刚性及共平面性越大，荧光效率越高 C、苯环上吸电子基团会增强荧光 D、苯环上给电子基团会增强荧光 E、荧光波长一般比激发波长要短 答案：ABD

6.下列关于环境对荧光影响的说法正确的有（ ）。 A、荧光强度一般会随温度升高而升高 B、溶剂极性增加使荧光强度增加 C、溶剂粘度增加使荧光强度降低 D、溶液的pH对荧光强度有较大影响 E、卤素离子是荧光猝灭剂的一种 答案：BE

7.下列物质属于荧光猝灭剂的有（ ）。 A、卤素离子 B、重金属离子 C、氧分子 D、羰基化合物 E、重氮化合物 答案：ABCDE

8.Which of the following factor have no effect on quantum efficiency of fluoresce（ ）. A、constitution B、concentration

7

C、temperature D、polarity of solvent E、gram-molecule 答案：BE

9.分子中有利于提高荧光效率的结构特征是（ ）。 A、双键数目较多 B、共轭双键数目较多 C、含重金属原子 D、分子为平面刚性 E、苯环上有给电子基团 答案：BDE

10.可以改变荧光分析法的灵敏度的措施是（ A、增强激发光源强度 B、降低溶剂极性 C、增加检测器的灵敏度 D、升高测量温度 E、增加溶剂极性 答案：AC

11.下列哪些取代基会减弱芳香化和物的荧光强度（ A、-NH2 B、-NO2 C、-OH D、-COOH E、-NR2 答案：BD 2.13

。 ）。8

） 知识点：基本原理S2

14.分子荧光法与紫外-可见分光光法的主要区别为（ ）。 A、 分析方法不同 B、 仪器结构不同 C、 灵敏度不同 D、 光谱带个数不同 E、 光源不同 答案：BCDE

15.使荧光增强的取代基团有（ ）。 A、―OH B、―Cl C、―OC2H5 D、―C=O E、―NO2 答案：ABC

16.使荧光减弱的取代基团有（ ）。 A、―COOH B、―Cl C、―SH D、―CN E、―NH2 答案：ABC

三、分析计算题

1.用荧光分析法测定食品中维生素B2的含量：称取2.00g食品，用10.0mL氯仿萃取（萃取率100%），取上清液2.00mL，再用氯仿稀释为10.0mL。维生素B2

9

氯仿标准溶液浓度为0.100µg·mL-1。测得空白溶液、标准溶液和样品溶液的荧光强度分别为：Fo=1.5，Fs=69.5，Fx=61.5，求该食品中维生素B2的含量（μg·g－1）。 答案：解 Fs- Fo=Kcs，Fx- Fo=Kcx

将Fo=1.5，Fs=69.5，Fx=61.5，cs=0.100μg·mL－1代入方程中， 解得 cx=0.088μg·mL－1

则 食品中维生素B2的含量= cx×10.0×10.0/2/2μg·g－1=22μg·g－1

2. 1.00g谷物制品试样，用酸处理，分离出核黄素及少量无关杂质，加入少量

KMnO4，将核素氧化，过量的KMnO4用H2O2除去。将此溶液移入50ml容量

瓶，稀释至刻度。吸取25ml放入试样池，测量荧光强度（核黄素中常含有发生荧光的杂质光化黄）。事先将荧光计用硫酸奎宁调整至刻度100处。测得氧化液读数为6.0格。加入少量还原剂连二亚硫酸钠（Na2S2O4），使氧化态核黄素（无荧光）重新转化为核黄素，这时荧光计读数为55格。在另一样品池中重新加入24ml被氧化的核黄素溶液，以及1ml核黄素标准溶液（0.5µg·mL-1），这时溶液的读数为92格，计算每克试样中含核黄素的g数？

解：设此谷物制试样中含核黄素cx（gg1），1.00g该谷物经题要求处理后配成50ml氧化核黄素，其浓度为

cxµg·mL-1，荧光计用硫酸奎宁调整至刻度50100处，测得氧化液读数为6.0格，为杂质荧光黄产生荧光。氧化核黄素重新还原，这时荧光计的读数为55格，由核黄素荧光读数与浓度成正比有 （55-6.0）=cx （1） 50另一试样中含24ml氧化核黄素溶液与1ml核黄素标准溶液0.5µg·mL-1，该体系含核黄素浓度为0.5/25µg·mL-1 ，其荧光计读数（核黄素与杂质荧光黄）为92格，故有

(926.0由（1）、（2）式联立解得

24)(0.5)/25 （2） 25cx0.5682µg·mL-1

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