三种呼吸道合胞病毒检测方法的临床应用研究

一医院收治的呼吸道感染住院患儿100例，分别采用聚合酶链式反应（PCR）-荧光探针法、酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金免

疫层析法（GICA）检测RSV,比较其阳性检出率％结果 PCR-荧光探针法和GICA的RSV阳性检出率均高于ELISA,差异有统 计学意义（P<0.05）% PCR-荧光探针法的RSV阳性检出率与GICA比较，差异无统计学意义（P〉0.05）%结论 PCR-荧光探针

法作为一种操作简单、敏感、快速、特异［检测方法，更适合在有条件［医院中推广使用；GICA法操作简便、快速、成本低廉，不需 要特殊仪器设备，适用于基层医疗单位的门诊筛查％上“ 2种检测方法有助于RSV早期诊断率的提高，值得临床推广使用％［关键词］聚合酶链式反应-荧光探针法；酶联免疫吸附试验；胶体金免疫层析法；呼吸道合胞病毒DOI：10. 3969/j. issn. 1009-5519. 2020. 22. 023 O中图法分类号：R446. 6章编号：10095519（2020）22361402 文献标识码:B呼吸道合胞病毒（RSV）是一种高度接触传染的 副粘病毒，是世界范围内严重影响婴幼儿健康和生命 的最重要病原体，目前尚无有效的预防措施随着

现红色圆斑，而T端未出现，则为RSV阴性；C端或

C端、T端均未出现红色圆斑，则为失效。病情的发展，RSV不仅可以引起上呼吸道感染，还有 可能导致肺炎、支气管炎等下呼吸道疾病不同种 类病原体引起的呼吸道感染，其治疗方法也不尽相

1.3统计学处理 采用SPSS10. 0软件进行数据分 析处理。计数资料以率或百分比表示，组间比较采用 犷检验。PV0.05为差异有统计学意义。2结 果PCR-荧光探针法和GICA的RSV阳性检出率均

同，快速有效的病原体检测分类，能为临床有针对性

的治疗提供有价值的参考依据病毒分离培养虽

高于ELISA，差异有统计学意义（P<0.05）。PCR-荧 光探针法的RSV阳性检出率与GICA比较，差异无

然是检测RSV感染的“金标准”，但其操作既烦琐又 耗时，而且费用高，因此临床应用受限。本研究分别 采用聚合酶链式反应（PCR）荧光探针法、酶联免疫吸

统计学意义（！>0.05）。见表1。表1

方法PCR-荧光探针法3种方法阳性检出率比较n附试验（ELISA）、胶体金免疫层析法（GICA）检测

RSV,以期筛选出快速、准确、方便的检测方法。阳性（n）32阴性（n）688677阳性率（％）100100100321资料与方法1. 1 一般资料 选取2017年6月至2018年6月运

城市第一医院收治的呼吸道感染住院患儿100例，其

ELISAGICA14231423中男57例，女43例；年龄2个月至5岁，平均（3. 48 +

1. 34）岁。3讨 论RSV是5岁以下小孩常见的呼吸道感染病原菌,

1.2方法（1）PCR -荧光探针法:无菌咽拭子采集标

本后置于冰袋冷藏箱，30〜60 min内送至检验科，标 本于一80 °C冰箱保存,待提取RNA备用。标本加入

是目前全球范围内公认的诱发儿童急性肺炎和毛细

支气管炎最为主要的病原体之一*5）。RSV的传染性 很强，易于引起爆发性流行，因此，RSV感染的治疗主

抽提液，混匀、静置、离心，去上清液，沉淀物加入稀释 液溶解，短暂离心后取上清RNA备用。参照试剂盒 及仪器操作说明进行PCR扩增反应。（2）ELISA：取

要以预防和阻断传播途径为主［6］0感染RSV的患儿

缺乏特异性临床症状及表现，疾病鉴别诊断难度较 大RSV经飞沫感染及接触感染，好发于冬季及春

试剂盒包被板每孔滴加稀释液和标本及阴阳对照液，

置于37 C孵育40 min,洗涤甩干后加酶标记物，置于

37 C孵育20 min,洗涤甩干加底物液，酶标仪上450

季，存在地域性差异。北方地区的高发季节为每年11 月份到次年4月份，而南方地区为每年3 — 6月份。

nm波长比色，空白孔调零，判定结果。（3） GICA：无 因此，对于RSV的预防要根据地域采取相应的预防

菌咽拭子采集标本后，加入洗脱液，滴管吸取标本加

入反应板标本孔，15 min后观察结果。如反应板孔C 端和T端均出现红色圆斑，则为RSV阳性；如C端出

措施，一旦发现儿童疑似RSV感染，应立即就医，尽 早确诊，隔离治疗，以期得到有效控制（10）。因此，快

速、有效的检测方法至关重要。基金项目：国家自然科学基金青年科学基金项目（11501498）。现代医药卫生 2020 年 1 月第 36 卷第 22 期 J Mod Med Health,November 2020,Vol. 36,No. 22・3615・，2013，2822)：1698-1701.本研究结果显示，PCR-荧光探针法和GICA的

RSV阳性检出率均高于ELISA，差异有统计学意义

丁雅馨，田润，钱渊，等•人呼吸道合胞病毒快速抗原检测方法的

CP<0.05)。病毒分离培养虽然是检测RSV感染的

“金标准”，但病毒分离周期长，一般需要1〜2周，因 此不符合临床上早确诊、早治疗的治疗方针。PCR-荧

床旁检测适用性探讨中华儿科杂志，2017,55(2):139-143.张海邻，陈小芳，吕芳芳，等•多重PCR技术检测儿童下呼吸道感

染病毒和不典型病原体的价值温州医科大学学报，2017,47(11)：791-795$程可萍，胡源，郎平，等•新生儿呼吸合胞病毒下呼吸道感染临床 分析中华医院感染学杂志，011，1(18):3823-3825.光探针法结合了 PCR和荧光探针2种技术，具备灵 敏度高、漏检率低及特异度高的特点(1112］，进一步提 高了检测的准确度。但该方法需要通过国家验证的

PCR检测实验室和专业检测人员，试验要求严格、成

陈嘉，顾文'，张新星，等.2013年至2015年苏州地区下呼吸道合

胞病毒与鼻病毒感染婴儿的临床特征比较:J］.中华实用儿科临

201732(16)：1239-1243$[6]本高，检测时限在3种检测方法中最长，不适合在基 层医疗单位推广使用。ELISA检测的是RSV抗原，

李亚敏，周为民，赵彦杰，等•浙南地区重症肺炎住院儿童中常见 呼吸道病毒感染的检测分析:J］.中国病毒病杂志，2015,16(3)： 189-193$其在感染RSV后需要一定的时间才能产生，且RSV 抗原效价的高低也直接影响检测结果。该方法虽然 操作简单，但易造成漏检，不适合临床广泛推广。GI­

CA 法不仅操作简单、成本低廉、试验要求不高、检测

郝欧美，王雪峰，赵雪，等.429例小儿肺炎常见病原分析中华

药 2018 33(4)：1353-1356$黄志英，程宝金，林红，等•江苏省常州地区急性呼吸道感染患儿

时限在3种检测方法中最短，而且阳性检出率高。因

呼吸道合胞病毒流行病学特点:J］.实用临床医药杂志，2014,23 (1)：125-127$孟婷玉，赵艳玲，黄艳智，等• 2016年吉林省小儿呼吸道合胞病毒 性肺炎临床流行病学特征:J］.中国实验诊断学，2017,21(6)： 1039-1040$(0］汤巧，夏梦宁，李霞，等.南京地区9种呼吸道病原体感染的流行

此，该方法更适合在基层医疗单位推广使用。综上所述,PCR-荧光探针法作为一种操作简单、 敏感、快速、特异的检测方法，更适合在有条件的医院 中推广使用；GICA法操作简便、快速、成本低廉，不需 要特殊仪器设备，适用于基层医疗单位的门诊筛查。

病学分析.重庆医学，2017,46(28):3959-3961.(11］ 郑琦，李悦，谭月弘，等.mariPOC法在儿童呼吸道病原体检测中

的应用(］•检验医学与临床201714(10):1495-1497.上述2种检测方法有助于RSV早期诊断率的提高， 值得临床推广使用。参考文献(1)夏秋玲，周利利，彭才静，等•巢式J合酶链反应与病毒分离培养

对呼吸道合胞病毒检测的差异及其临床意义:J］.中华实用儿科(12］ 吴意，金娴，樊春卉，等.单管双重巢式聚合酶链反应及基因测序

技术鉴别呼吸道合胞病毒A,B亚型:J］.现代检验医学杂志, 2018，33(1):44-48(收稿日期：2020-0519 修回日期：2020-07-30)•临床研究•羊膜移植术在化学性眼烧伤中的临床应用研究\"武明星，姚浩％(重庆医科大学附属第二医院眼科，重庆400010)［摘 要］目的 探讨羊膜移植术在化学性眼烧伤中的临床效果%方法 选取2015年1月至2019年12月该院收治的各

种化学性眼烧伤患者142例(238眼)，将&〜5度烧伤患者按照治疗方式分为行羊膜移植术组［81例(137眼门和未行羊膜移植

术组［45例(78眼)(，比较2组视力恢复及并发症发生情况%结果 经治疗后！42例(238眼)患者中，视力大于或等于0. 8者22 例 36 眼(15. 1%) 0. 3〜<0 8 者 63 例 112 眼(47. 1%) ,0. 05〜<0 3 者 46 例 72 眼(30.3%) ,<0. 05 者 11 例 18 眼(7.6%)% 2

组视力恢复情况比较，差异有统计学意义(P<0 05)% 2组无严重并发症的比例比较，差异有统计学意义(P<0 05)%结论羊 膜具有取材方便、手术简单、费用低廉等优势，且羊膜移植术可反复施行％化学性眼烧伤发生后及时实施羊膜移植术，对于保留患

眼眼球及恢复视力具有很大的作用%［关键词］ 化学性眼烧伤；羊膜移植；并发症；预后DOI：10. 3969/j. issn. 1009-5519. 2020. 22. 024

中图法分类号：R779.13文献标识码:B文章编号：1009-5519(2020)22-3615-03

眼烧伤是眼外伤中较常见和较严重的一种创伤, 烧伤、农药烧伤等’化学性眼烧伤的特点是起病急% 病情重，早期常致角膜结膜融解坏死、角膜穿孔、眼内其中最常见的是化学性烧伤，如酸碱烧伤、工业原料\" 基金项目：国家自然科学基金青年科学基金项目(1901765)。% 通信作者 «E-mail： 383319979@qq. com。