实验三 骨骼肌单收缩的分析
一. 目的与要求:
1. 学习神经-肌肉实验的电刺激方法及肌肉收缩的记录方法 2. 观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系
3. 学会分析单收缩过程的三个时期――潜伏期、缩短期和舒张期 4. 了解骨骼肌收缩的总和现象
5. 观察不同频率的阈上刺激引起肌肉收缩形式的改变
二. 基本原理
1. 受坐骨神经支配的腓肠肌由许多肌纤维组成,当用不同的刺激强度刺激坐骨神经
时,会引起肌肉的不同反应。当刺激强度过小时,不引起肌肉发生收缩反应,称阈下刺激。逐渐增大刺激强度,可引起少数肌纤维发生收缩反应,引起收缩反应的最小有效强度。随刺激强度增大,参加收缩反应的肌纤维数量增多,收缩力加大,此时刺激为阈上刺激。待全部肌纤维均参加了收缩反应,即出现最大收缩反应,即使再增加刺激强度,肌肉收缩力量也不再加大。可以引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度称为最适刺激。
2. 肌肉组织对于一个阈上强度的刺激发生一次迅速的收缩反应,称为单收缩。单收缩
过程可分为潜伏期、缩短期和舒张期。
3. 两个同强度的阈上刺激相继作用于神经-肌肉标本,若刺激间隔大于单收缩的时
程,则肌肉出现两个分离的单收缩;若刺激间隔小于收缩的时程,则出现两个两个收缩反应的重合,称为收缩的总和。当同强度的连续阈上刺激作用于标本时,出现多个收缩反应的融合,称为强直收缩。不完全强直收缩――后一收缩发生在前一收缩的舒张期;完全强直收缩――后一收缩发生在前一收缩的收缩期,各自的收缩完全融合后,肌肉处于持续的收缩状态。
三. 动物、器材与试剂
1. 动物:蟾蜍
2. 器材:常用手术器械(手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针)、
大剪刀、棉线、烧杯、滴管、蛙钉、蜡盘、铁架台、滑轮、刺激电极、张力转换器 3. 试剂:任氏液
四. 方法、步骤与结果
1. 双毁髓:方法同上次实验
2. 将整只蟾蜍背面向上,四肢用蛙钉固定于蜡盘中,剥去一后肢皮肤,用玻璃分针分
离坐骨神经上至大腿根部,下至膝关节,剪断沿途支配大腿肌肉的分支,并用玻璃分针尽可能出去坐骨神经表面筋膜;用棉线绑紧腓肠肌肌腱,自后方剪断该肌腱,分离腓肠肌,制得在体的坐骨神经-腓肠肌标本。 3. 将棉线穿过一滑轮,再穿过张力转换器的小孔,打紧绑紧,调节蜡盘及铁架台位置,
使棉线适当紧张,且绑住腓肠肌肌腱的棉线着力方向顺着腓肠肌的自然姿态。
4. 确定PowerLab系统连接正确,打开PowerLab和Chart,在Chart上调整初始设定,
生理学实验第三组 同组:
设定刺激间隔为5s,波宽2.56ms,调节无刺激平直线近零点,并调节蜡盘和铁架台位置使尽量去处杂波,即使腓肠肌处于最适长度。
5. 在Isolated Stimulate窗口中设置刺激频率为1,强度为100μA×20,作出一个单收
缩的波形图 1.0 0.5 0.0 -0.5 -1.0 -1.5 -2.0 2 04-9-21 15:28:54.320 Channel 8 1.7 1.8 1.9 2 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6
单收缩波形
6.设定间隔时间为5s,频率为6,刺激电压单位为100μA,设定刺激电压从100μA×1
开始逐步增加电压强度直至100μA×15。观察到当刺激为100μA×4时出现一小波,
逐渐增大至100μA×13时到达顶峰,再增大到100μA×15几乎没有变化,最后增大到100μA×30肌肉张力也没有变化。如图:
0.5 Channel 8 (mV) 0.0 -0.5 -1.0 -1.5 100μA× 1
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 30 波形图
生理学实验第三组 同组:
210Channel 1 (mV)500000000000000000 刺激图
7.设定刺激强度为20×100μA,设定时间间隔为3s,刺激频率由小到大,连续刺激标本。
实验中由1Hz开始,只出现分隔的单收缩波,2Hz的情况相同,但是波的数量增多,以后每次加大1Hz,至12Hz出现强直收缩图形,再增加到15Hz情况依旧。如图
2 Channel 8 (mV) 1 0 -1 -2 Hz 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 15 波形图
215Channel 1 (mV)10500000000000000 刺激图
生理学实验第三组 同组:
五. 思考题
1. 如何保持标本在实验过程中机能稳定?
答:a.避免金属器械碰压、触及或损伤神经及腓肠肌; b.避免破坏组织的生理状态;
c.实验过程中应不时用任氏液湿润标本,防止干燥; d.所加的刺激不能过强,频率不能过大。
2. 找出标本的阈强度,最适刺激强度
答:阈强度约3×100μA~4×100μA间,最大刺激强度约13×100μA~14×100μA间。
3. 你所制备的标本兴奋性如何?指标是什么?
答:兴奋性良好。较小的刺激即能引起较大的动作电位。
4. 单收缩过程中的潜伏期包括哪些生理过程?
答:包括兴奋传递、Ach的量子式释放、三连管处Ca离子释放以及兴奋-收缩耦合。
5. 讨论肌肉发生不完全强直收缩及完全强直收缩的条件,人们日常生活种哪些动作属
于强直收缩?
答:后-收缩发生在前一收缩的舒张期时,称为不完全强直收缩;后收缩发生在前-收缩的收缩期时,各自的收缩完全融合,肌肉处于持续的收缩状态,称为完全强直收缩。人们日常生活中的强直收缩的动作很多,如持物品,拿水杯等。
6. 何谓临界融合刺激频率?
答:即指能使肌肉发生完全强直收缩的最小刺激频率。
六. 讨论
1. 在PowerLab系统中Chart显示的刺激为何是等高的?如下图(但此时的刺激电压并
不相同,,为递增状态)
210Channel 1 (mV)500000000000000000
2.波宽为何为2.56ms?
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