一种纳米凝胶的制备方法[发明专利]

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 107865444 A(43)申请公布日 2018.04.03

(21)申请号 201711228685.5(22)申请日 2017.11.29

(71)申请人 陕西易阳科技有限公司

地址 710000 陕西省西安市高新区高新路

枫叶高层35号602室(72)发明人 张俊　

(74)专利代理机构 西安亿诺专利代理有限公司

61220

代理人 韩素兰(51)Int.Cl.

A23L 33/125(2016.01)A23L 33/185(2016.01)

权利要求书1页 说明书3页

(54)发明名称

一种纳米凝胶的制备方法(57)摘要

本发明涉及一种纳米凝胶的制备方法，其包括以下制备步骤：取以下原料备用：低温脱脂豆粕、葡聚糖、ANS；大豆7S球蛋从低温脱脂豆粕中分离而得；本发明所述方法制备的纳米凝胶，具有高度稳定性，在pH 2～12范围内没有二次聚集，其粒径基本不变；在4℃下存放13个月粒径变化不大；冻干复溶对纳米凝胶的粒径基本没有影响。具有良好的应用前景。

CN 107865444 ACN 107865444 A

权　利　要　求　书

1/1页

1.一种纳米凝胶的制备方法，其特征在于包括以下制备步骤：（1）取以下原料备用：低温脱脂豆粕、葡聚糖、ANS；（2）大豆7S球蛋从低温脱脂豆粕中分离而得；（3）分别取质量比为1:1的大豆7S球蛋白和葡聚糖混合，将混合物溶解于去离子水中使其浓度各达100g/L，充分搅拌4-8h，调pH至7-9，并进行冷冻干燥；（4）干燥后的粉末过筛孔尺寸为0.125mm的筛网，然后放置在底部装有饱和KBr溶液的干燥器中，于60℃中反应4d；（5）所得产物按质量体积比1:10的比例加入去离子水，搅拌一定时间使其充分溶解；（6）10000g离心15min后，上清液进行冷冻干燥，所得粉末即为SDC，置于干燥器中保存备用；（7）取一定量的SDC粉末溶解于一定量的去离子中配成浓度为1mg/ml的均一溶液，用0.1L的HCl溶液调节pH至3-5，然后放置在80-100℃的水浴中孵育30-60min，冷却后即为SDN。

2.如权利要求1所述一种纳米凝胶的制备方法，其特征在于所述步骤（4）中干燥器的相对湿度为79%。

3.如权利要求1所述一种纳米凝胶的制备方法，其特征在于所述步骤（2）的PH值为7。4.如权利要求1所述一种纳米凝胶的制备方法，其特征在于所述步骤（7）的PH值为4.8。5.如权利要求1所述一种纳米凝胶的制备方法，其特征在于所述步骤（7）的水浴温度为95℃，水浴时间为50min。

2

CN 107865444 A

说　明　书

一种纳米凝胶的制备方法

1/3页

技术领域

[0001]本发明涉及一种纳米凝胶的制备方法。

背景技术

[0002]近年来，纳米科技成为了最富活力及最具发展潜力的新兴技术，纳米材料由于其独特的表面效应与小尺寸效应等得到了广泛的关注。构建纳米材料的方法分“从上至下”法和“从下至上”法。自组装作为一种“从下至上”法，是指基本单元自发地从无序状态变成有序聚集体的方法。2009年，Schmitt等用1%β-乳球蛋白在pH3～7的范围内通过自组装法制备β-乳球蛋白微胶。研究发现，β-乳球蛋白在pH＜4.8或pH＞5.6的条件下会形成线形可溶性聚集体，而在等电点范围内pH4.8～5.6能形成具有胶体稳定性的球形微胶。2014年，Chen等用大豆蛋白在pH5.9的条件下于95℃加热制备具有一定稳定性的大豆蛋白纳米凝胶，但该纳米凝胶具有pH敏感性。[0003]大量研究表明，两亲性嵌段共聚物可以自组装形成稳定的具有核壳结构的纳米粒子。蛋白与多糖是食品体系中两大类天然大分子材料，通过自发的Maillard反应可以使蛋白的ε-或α-氨基与还原糖的羰基发生共价结合，得到具有优越功能特性的蛋白质-多糖共价复合物。因此，通过Maillard反应制备出两亲性嵌段共聚物并进一步自组装可以得到蛋白质-多糖纳米凝胶。Wu等利用Maillard反应的产物及其水解产物通过反溶剂法制备球形的纳米粒子，但所用的戊二醛-乙醇交联剂具有一定的毒性，不利于制备环境友好型纳米材料。Li等研究利用Maillard反应和加热凝胶法制备水合直径约为200nm的溶菌酶-葡聚糖纳米凝胶，并对布洛芬进行负载。研究表明，该纳米凝胶具有较高的稳定性，在一定pH范围内不发生聚集或解离。然而，研究表明，当颗粒的尺寸降至纳米级时，有利于改善其在体内的缓释效果，增长其在体内的循环时间。大豆7S球蛋白是大豆中主要的蛋白，具有降低胆固醇、降血脂等改善脂肪代谢的功能。国内外关于大豆7S球蛋白与多糖的共价结合反应已经有了相关的研究报道，在此研究基础上进一步发现大豆7S球蛋白通过多糖共价结合后可以很好地进一步组装形成纳米凝胶，利用蛋白多糖复合物自组装构建纳米粒子，是一种安全无毒、绿色环保的加工方式。目前以Maillard反应制备蛋白质-多糖共价复合物纳米凝胶的研究基本还未涉及。

发明内容

[0004]本发明提出一种纳米凝胶的制备方法。[0005]本发明所述一种纳米凝胶的制备方法，其包括以下制备步骤：

（1）取以下原料备用：低温脱脂豆粕、葡聚糖、ANS；（2）大豆7S球蛋从低温脱脂豆粕中分离而得；（3）分别取质量比为1:1的大豆7S球蛋白和葡聚糖混合，将混合物溶解于去离子水中使其浓度各达100g/L，充分搅拌4-8h，调pH至7-9，并进行冷冻干燥；

（4）干燥后的粉末过筛孔尺寸为0.125mm的筛网，然后放置在底部装有饱和KBr溶液的

3

CN 107865444 A

说　明　书

2/3页

干燥器中，于60℃中反应4d；

（5）所得产物按质量体积比1:10的比例加入去离子水，搅拌一定时间使其充分溶解；（6）10000g离心15min后，上清液进行冷冻干燥，所得粉末即为SDC，置于干燥器中保存备用；

（7）取一定量的SDC粉末溶解于一定量的去离子中配成浓度为1mg/ml的均一溶液，用0.1L的HCl溶液调节pH至3-5，然后放置在80-100℃的水浴中孵育30-60min，冷却后即为SDN。

[0006]优选地，所述步骤（4）中干燥器的相对湿度为79%。[0007]优选地，所述步骤（2）的PH值为7。[0008]优选地，所述步骤（7）的PH值为4.8。[0009]优选地，所述步骤（7）的水浴温度为95℃，水浴时间为50min。[0010]本发明所述方法制备的纳米凝胶，具有高度稳定性，在pH 2～12 范围内没有二次聚集，其粒径基本不变；在4℃下存放13 个月粒径变化不大；冻干复溶对纳米凝胶的粒径基本没有影响。具有良好的应用前景。具体实施方式

[0011]实施例1。

[0012]本发明所述一种纳米凝胶的制备方法，其包括以下制备步骤：

（1）取以下原料备用：低温脱脂豆粕、葡聚糖、ANS；（2）大豆7S球蛋从低温脱脂豆粕中分离而得；（3）分别取质量比为1:1的大豆7S球蛋白和葡聚糖混合，将混合物溶解于去离子水中使其浓度各达100g/L，充分搅拌4-8h，调pH至7-9，并进行冷冻干燥；

（4）干燥后的粉末过筛孔尺寸为0.125mm的筛网，然后放置在底部装有饱和KBr溶液的干燥器中，于60℃中反应4d；

（5）所得产物按质量体积比1:10的比例加入去离子水，搅拌一定时间使其充分溶解；（6）10000g离心15min后，上清液进行冷冻干燥，所得粉末即为SDC，置于干燥器中保存备用；

（7）取一定量的SDC粉末溶解于一定量的去离子中配成浓度为1mg/ml的均一溶液，用0.1L的HCl溶液调节pH至3-5，然后放置在80-100℃的水浴中孵育30-60min，冷却后即为SDN。

[0013]本实施例所述步骤（4）中干燥器的相对湿度为79%；所述步骤（2）的PH值为7。[0014]实施例2。

[0015]本发明所述一种纳米凝胶的制备方法，其包括以下制备步骤：

（1）取以下原料备用：低温脱脂豆粕、葡聚糖、ANS；（2）大豆7S球蛋从低温脱脂豆粕中分离而得；（3）分别取质量比为1:1的大豆7S球蛋白和葡聚糖混合，将混合物溶解于去离子水中使其浓度各达100g/L，充分搅拌4-8h，调pH至7-9，并进行冷冻干燥；

（4）干燥后的粉末过筛孔尺寸为0.125mm的筛网，然后放置在底部装有饱和KBr溶液的干燥器中，于60℃中反应4d；

4

CN 107865444 A

说　明　书

3/3页

（5）所得产物按质量体积比1:10的比例加入去离子水，搅拌一定时间使其充分溶解；（6）10000g离心15min后，上清液进行冷冻干燥，所得粉末即为SDC，置于干燥器中保存备用；

（7）取一定量的SDC粉末溶解于一定量的去离子中配成浓度为1mg/ml的均一溶液，用0.1L的HCl溶液调节pH至3-5，然后放置在80-100℃的水浴中孵育30-60min，冷却后即为SDN。

[0016]本实施例所述步骤（4）中干燥器的相对湿度为79%；所述步骤（2）的PH值为7；所述步骤（7）的PH值为4.8；所述步骤（7）的水浴温度为95℃，水浴时间为50min。

5