USP35 401

401 脂肪和不挥发油

下述定义和通用步骤适用于脂肪、不挥发油、蜡、树脂、香脂和相似的物质。

样品制备

如果所取油试样因为硬脂酸甘油酯而显浑浊，则将其放置在一个容器中并置50摄氏度的水浴中加热直至液体变澄清。于保温漏斗中，用干燥滤纸过滤。将滤液混合彻底，根据测试项目的需要，一次性称取对应份数的样品于不同的、含有移液滴管或称重滴定管的瓶中。整个操作过程中，应保证油试样处于融化状态，直至取样结束。

检测项目

比重

按841的方法测比重。

熔解温度

按741的方法测溶解温度。

酸值（游离脂肪酸）

在本药典中，脂肪和不挥发油的酸度可以用中和10g油试样中游离酸所耗0.1N浓度的碱的毫升数来表示。通常情况下，酸度也叫做酸值，是中和1.0g油试样中游离酸所消耗的氢氧化钾的毫克数。除非所测药品的单章里面有规定，否则一般按下述方法进行测定。 方法：精确称定10.0g油样品，将其溶解于含有25ml乙醇和25ml乙醚混合溶液的烧瓶中（该混合溶液在使用之前已用0.1N浓度的氢氧化钾或氢氧化钠溶液中和至对酚酞显中性）。如果样品不溶于冷的溶剂中，则在烧瓶上安装一个合适的冷凝器，缓缓加热并不时振摇，直至样品溶解。往样品样中加1ml酚酞试液，用0.1N浓度的氢氧化钾滴定液或0.1N浓度的氢氧化钠滴定液进行滴定，滴定至将溶液振摇30秒其仍显淡粉色为止。

计算酸值或者中和10.0g油样品中游离脂肪酸所消耗的0.1N浓度的碱的毫升数。按如下公式计算酸值：

56.11V×N/W

其中，56.11是氢氧化钾的分子量，V是毫升数，N是碱液的当量浓度，W是所取样品的重量。

如果滴定消耗的0.1N浓度的氢氧化钾滴定液或0.1N浓度的氢氧化钠滴定液不足2ml，则应该适当的稀释该滴定液，或者增大样品量。

如果样品保存是通过充满二氧化碳进行的，则在滴定前先轻微的回流乙醇-乙醚混合溶液10分钟。

酯化值

酯化值是指皂化1.0g油试样中酯消耗的氢氧化钾毫克数。如果皂化值和酸值都已确定，则酯化值等于皂化值减去酸值。

方法：称取1.5~2.0g油样品于去皮的250ml烧瓶中，加入20~30ml已中和的乙醇，摇匀。往溶液中加入1ml酚酞试液，用0.5N浓度的氢氧化钾乙醇滴定液滴定，直至游离酸被中和

完全。加入25.0ml，0.5N浓度的氢氧化钾乙醇滴定液，安装合适的冷凝器后，在蒸气浴上加热回流30分钟，回流过程中需频繁旋摇烧瓶（回流时间也可根据酯类的不同延长至90分钟，来保证皂化完全）。按如下公式计算皂化值：

[56.11(VB-VT)N]/W 其中，56.11是氢氧化钾的分子量；VB是空白试验消耗的0.5N浓度盐酸的毫升数，VT是实际试验中消耗的0.5N浓度的盐酸的毫升数；N是盐酸真实当量浓度；W是所取样品的克数。

皂化值

皂化值是指中和 1.0g油试样中游离酸并皂化其中酯类所消耗的氢氧化钾毫克数。

方法：称取1.5~2.0g油样品于去皮的250ml烧瓶中，加入0.5N浓度的氢氧化钾乙醇溶液25.0ml。安装合适的冷凝器后，在蒸气浴上加热回流30分钟，回流过程中需频繁旋摇烧瓶（回流时间也可根据酯类的不同延长至90分钟，来保证皂化完全）。往溶液中加入1ml酚酞试液，并用0.5N浓度的盐酸滴定液滴定过剩的氢氧化钾。在同样条件下进行空白试验。 按如下公式计算皂化值：

[56.11(VB-VT)N]/W

其中，56.11是氢氧化钾的分子量；VB是空白试验消耗的0.5N浓度盐酸的毫升数，VT是实际试验中消耗的0.5N浓度的盐酸的毫升数；N是盐酸真实当量浓度；W是所取样品的克数。

不皂化物

方法：精确称取5.0g油试样于250ml的锥形瓶中，加入50ml由12g氢氧化钾溶于10ml水并加乙醇稀释至100ml的溶液，将锥形瓶安装合适的回流装置后，将其置于蒸气浴上回流1小时，回流过程中需频繁旋摇锥形瓶。回流后，将溶液冷却至25℃以下后，将其转移至一个配有聚四氟乙烯旋塞阀的分离器中，用两份50ml水冲洗锥形瓶并将洗液合并至分离器中（旋塞阀不能涂抹润滑剂）。用3份各100ml的乙醚萃取溶液，将萃取液合并至另外一个含有40ml水的分离器中。轻轻地转动并振摇分离器数分钟（注意：如果震荡过于猛烈会生成难以分离的乳状液）。将混合液静置分层，去掉底层水相，用两份各40ml的水洗乙醚层，静置分层后，去掉水层。然后对乙醚层用40ml氢氧化钾溶液（3 in 100）洗涤，再用40ml的水洗涤，并将这两种洗涤按次序重复三次。用数份40ml的水洗涤乙醚层，直至往分离的水层中滴加2滴酚酞试液不再显红色为止。将乙醚层转移至去皮的烧瓶中，用10ml乙醚冲洗分离器并将洗液合并至烧瓶中。在蒸气浴中加热使乙醚蒸发，并往烧瓶残渣中加入6ml丙酮。通气使丙酮被带走除掉，然后在105℃将残渣干燥，直至连续称量差异不大于1mg。按如下公式计算样品中不皂化物的百分比：

100（WR/WS）

其中，WR是残渣重量的克数；WS是样品重量的克数。

注意：将残差溶于已事先中和至对酚酞显中性的20ml乙醇中，加入酚酞试液，用0.1N浓度的氢氧化钠乙醇滴定液滴定至首次出现淡粉红色并且能持续30秒。如果所消耗的0.1N浓度氢氧化钠乙醇滴定液多于0.2ml，则说明分离过程不完全，称量所得的残渣重量不能视为不皂化物，试验应该重新进行。

羟基值

羟基值是等同于1.0g油样品中羟基含量的氢氧化钾毫克数。

“吡啶-醋酸酐”试剂： 在使用之前配制，将3当量新开或新蒸馏的吡啶与1当量的新开或新蒸馏的醋酸酐混合。

方法：根据下表对应关系，称取一定量的样品于250ml的具玻璃塞锥形瓶中，加入5.0ml

吡啶-醋酸酐试剂。向另一个250ml的具玻璃塞锥形瓶中加入5.0ml吡啶-醋酸酐试剂，作为空白对照。将两个烧瓶分别安装上合适的玻璃接口的回流冷凝装置，在蒸气浴上加热1小时后，通过冷凝管分别加入10ml水，然后再继续蒸气浴10分钟。将烧瓶冷却，同时配制0.5N浓度的用氢氧化钾乙醇溶液中和至对酚酞显中性的丁醇，然后各自通过冷凝器加入15ml该丁醇，然后移去冷凝器，再分别用10ml该丁醇洗涤各内壁。向两个烧瓶中各自加入1ml酚酞试液，用0.5N浓度的氢氧化钾乙醇滴定液滴定，记录所消耗的氢氧化钾乙醇滴定液的毫升数，试液中消耗的记为T，空白对照中消耗的记为B。向

125ml的锥形瓶中加入10g油样品，并加入10ml新蒸馏的并已事先中和至对酚酞显中性的吡啶，混合均匀，加入1ml酚酞试液，用0.5N浓度的氢氧化钾乙醇滴定液滴定，记录样品中游离酸消耗的氢氧化钾乙醇滴定液毫升数为A。按如下公式计算羟基值：

(56.11N/W)[B+(WA/C)-T]

其中，W是用于乙酰化的样品克数，C是用于游离酸测定的样品克数，N是氢氧化钾乙醇滴定液的真实当量浓度，56.11是强氧化钾的分子量。如果样品酸值已知，可用如下公式计算羟基值：

(56.11N/W)[B-T]+Acid Value

其中，W是用于乙酰化的样品克数，N是氢氧化钾乙醇溶液的当量浓度，56.11是氢氧化钾的分子量。 羟基值大概范围 0-20 20-50 50-100 100-150 150-200 200-250 250-300 300-350 碘值

碘值是指100g油样品在规定条件下吸收的碘单质克数。 方法：参考下表精确称取一定量的油样品于250ml的碘瓶中，加10ml氯仿使溶解，加入25.0ml溴化碘试液，塞紧塞子，避光放置30分钟，放置过程中偶尔振摇几次。然后顺次加入30ml碘化钾试液，100ml水，然后用0.1N浓度的硫代硫酸钠滴定液滴定离析的碘，每滴加一滴滴定液都要彻底振摇溶液。当碘的棕色变得很淡的时候，往溶液加3ml淀粉试液，继续用0.1N浓度的硫代硫酸钠滴定液滴定至蓝色消失。同时在相同条件下做空白对照。按照下式计算碘值：

[126.90(VB-VS)N]/(10W) 其中，126.90是碘的原子量，VB是空白对照中消耗的

0.1N浓度的硫代硫酸钠滴定液的毫升数，VS 是检测溶液中消耗的0.1N浓度的硫代硫酸钠滴定液的毫升数，N是硫代硫酸钠滴定液的实际当量浓度，W是所用样品的克数。 预估碘值 <5 2-20 21-50 51-100 建议样品用量 ±0.1 3.0 1.0 0.4 0.2 参考样品用量/克数 10 5 3 2 1.5 1.25 1.0 0.75 101-150 151-200 0.13 0.1 过氧化值

过氧化值是指1000g油样品所含的过氧化物，用活性氧的毫当量来表示。（注意：这项测试应在取样后迅速进行，以免油样品被氧化。）

方法：精确称取约5g样品，置于250ml的具毛玻璃塞锥形瓶中，加入30ml冰醋酸和氯仿的混合物（3:2），振摇使样品溶解，然后加入0.5ml饱和碘化钾溶液。振摇1分钟，再加入30ml水。用0.01N浓度的硫代硫酸钠滴定液滴定，滴加滴定液过程需缓慢并持续振摇，直至溶液黄色快要消失为止。加入5ml淀粉试液，继续滴定并猛烈振摇，直至蓝色消失。同时按相同条件作空白对照。需注意，空白对照中使用的滴定液应不超过0.1ml。按下式计算过氧化值：

[1000(VT-VB)N]/W

其中，VT 是检测溶液中消耗的0.01N硫代硫酸钠滴定液的毫升数，VB 对照溶液中消耗的0.01N硫代硫酸钠滴定液的毫升数，N是硫代硫酸钠滴定液的当量浓度，W是样品克数。

茴香胺值

试液A：将0.500g油样品溶于异辛烷中，并稀释至25.0ml。

试液B：往5.0ml试液A中加入1.0ml，2.5g/L的对氨基苯甲醚冰醋酸溶液，振摇，避光保存。

标准溶液：往5.0ml异辛烷中加入1.0ml，2.5g/L的对氨基苯甲醚冰醋酸溶液，振摇，避光保存。放至刚好10分钟后使用。

方法：测定试液A在350nm的吸收度，以异辛烷作空白补偿。测定试液B在350nm的吸收度，以标准溶液做补偿。按下式计算茴香胺值：

25(1.2AS-AB)/m

其中，AS是试液B在350nm波长的吸收度，AB是试液A在350nm波长的吸收度，m是样品的重量克数。

总氧化值

总氧化值由如下公式计算：

2PV+AV

其中，PV是过氧化值，AV是茴香胺值。

脂肪酸凝固点

脂肪酸制备：取75ml甘油-氢氧化钾溶液（25g氢氧化钾溶于100ml甘油制备而来）于800ml的烧杯中，加热至150℃，加入50ml澄清的脂肪，如果是固体，要先将其融化。继续加热烧杯中混合物15分钟并频繁搅拌，保持温度不超过150℃。当烧杯中混合物变得均匀，溶液顶端凹液面没有颗粒物附着于烧杯壁时说明皂化完全。皂化完全后，将烧杯中混合物导入含有500ml近乎沸腾的水的800ml的烧杯或有柄蒸发皿中，缓缓加入50ml稀硫酸（水/硫酸：3/1），加热溶液并频繁搅拌，直至脂肪酸层变得澄清透明。用沸水洗涤上层脂肪酸直至其中无硫酸，将脂肪酸层收集到一个小烧杯中，置于蒸气浴上加热，直至水层分离，脂肪酸层变得澄清。趁热将脂肪酸层转至一个干燥的烧杯中，在105℃干燥20分钟。将此温热的脂肪酸放置到一个合适的容器中，在冰浴中冷却至凝固。

完全造化检测：取3ml干燥的以上脂肪酸于试管中，加入15ml乙醇。加热混合溶液至沸腾，加入等体积的6N浓度的氨水，溶液应变的澄清。 装置：

如上图所示。装油样品的为25×100mm的试管，安装有短程温度计，悬置于试管中；30cm长的，底端弯成围绕温度计的平面圆环作为搅拌器。短程温度计的量程应不超过30°，具0.1°的刻度。样品试管应配有橡胶塞，并置于密闭防水的直径50mm，长11cm的圆柱体容器中，而这个圆柱体容器则被置于一个浴锅中，该浴锅能够使圆柱体容器底部和侧面都被37mm厚的溶液包围。浴锅应配有温度计。

方法：如果样品是固体，则先在不超过预估凝固点20℃的温度下加热融化，将液体样品倒入试管中，使其高度为50-57mm左右，将试管中温度计的感温包整个置于样品液体中，但不触及管底。将浴锅用比样品预估凝固点低4-5℃的液体注满至离试管顶部12mm的高度。如果样品在室温下就是液体，则用比样品预估凝固点低15℃的液体冲注

浴锅。当样品被冷却至其凝固点之上5℃时，调整浴锅中液体温度至比样品预估凝固点低7-8℃。在接下来的冷却过程中，持续地将平面环形搅拌器提起放下，以此来搅拌样品，搅拌频率应一分钟上下

感谢您的阅读，祝您生活愉快。