香豆素类化合物清除自由基及抗肿瘤活性研究

基础研究　食品研究与开发　ＦＯＯｄ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ａｎｄ　ＤｅｖｅｌｏＤｍｅｎｔ　２０１６年１月　第３７卷第１期　香豆素类化合物清除自由基及抗肿瘤活性研究　张娜。陈文娟。柳青青，周碉，钟儒刚　（北京工业大学生命科学与生物工程学院，北京１００１２４）　摘要：运用电子顺磁共振（ＥＰＲ）和细胞增殖检测试剂盒（ＭＴｓ）两种方法研究４个双羟基香豆素化合物及天然产物ｖ　的清除ＤＰＰＨ自由基及抗肿瘤细胞增殖的能力。结果表明，香豆素化合物清除ＤＰＰＨ自由基ＥＣ　值和抗肿瘤细胞增殖　活性Ｉｃ∞值的范围分别为９．０４￣ｍｏｌ／Ｌ～３７．３２￣ｍｏｌ／Ｌ和２１．７６　ｔｘｍｏｌ／Ｌ一３８．４８　ｌｒｍｏｌ／Ｌ，均优于Ｖｃ自由基清除能力（ＥＣ∞为　４２．４４Ｉ￣ｍｏｌ／Ｌ）和抗肿瘤细胞增殖能力（ＩＣ∞为＞１００Ｉｚｍｏｌ／Ｌ）。其中，化合物ｌａ的清除自由能力最强（ＥＣ　为９．４Ｉ０￣ｍｏｌ／Ｌ），　化合物２ｂ的抗肿瘤活性最高（ＩＣ　为２１．７６￣ｍｏｌｌＬ）。因此，与Ｖｃ相比，４个双羟基类化合物表现出较强的自由基清除能　力和抗肿瘤细胞增殖活性，为具有癌症防治功能的天然产物抗氧化剂的开发利用提供理论基础和试验依据。　关键词：香豆素；自由基清除能力；抗肿瘤活性；ＥＰＲ；ＭＴＳ　Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　Ｒａｄｉｃａｌ　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｎｄ　Ａｎｔｉ—ｔｕｍｏｒ　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ＺＨＡＮＧ　Ｎａ，ＣＥＨＮ　Ｗｅｎ－ｊｕａｎ，ＬＩＵ　Ｑｉｎｇ—ｑｉｎｇ，ＺＨＯＵ　Ｙｕｅ，ＺＨＯＮＧ　Ｒｕ－ｇａｎｇ　（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１００１２４，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ＤＰＰＨ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｎｄ　ａｎｔｉ—ｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｆｏｕｒ　ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ　ａｎｄ　Ｖｃ　ｗｅｒｅ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｕｓｉｎｇ　ｅｌｅｃｔｒｏｎ　ｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃ　ｒｅｓｏｎａｎｃｅ（ＥＰＲ）ａｎｄ　ＭＴＳ　ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｈａｔｔ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅｓ　ｏｆ　ＥＣ５０（ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｂｉｌｉｔｙ）ａｎｄ　ＩＣ５ｏ（ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙ）ｖａｌｕｅｓ　ｏｆｆｏｕｒ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　９．０４　Ｉ￣ｍｏｌ／Ｌ－３７．３２　Ｉ￣ｍｏｌ／Ｌ　ａｎｄ　２１．７６　Ｉ￣ｍｏｌ／Ｌ－３８．４８　Ｉ￣ｍｏｌ／Ｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄ　ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ　ｔｈｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｎｄ　ａｎｔｉ—ｔｕｍｏｒ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｆｏｕｒ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｍｏｒｅ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　Ｖｃ　ｗｉｔｈ　ＥＣｓ０＝４２．４４￣ｍｏｌ／Ｌ　ａｎｄ　ＩＣ５０　＞１００　Ｉｘｍｏｌ／Ｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｌａ（ＥＣ５０＝９．０４￣ｍｏｌ／Ｌ）ａｎｄ　２ｂ（ＩＣ５０＝２１．７６￣ｍｏｌ／Ｌ）ｗｅｒｅ　ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ａｔ　ＤＤＰＨ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｎｄ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｉｎ　ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　Ｖｃ，　ｆｏｕｒ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ　ｍｏｒｅ　ｐｏｔｅｎｔｉｌ　ａｂｉｌｉｔａｙ　ａｔ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｎｄ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，　ａｎｄ　ｗｅｒｅ　ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｎａｔｕｒａｌ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｗｉｔｈ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｂｉｌｉｔｙａｎｄ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｅｏｕｍａｒｉｎｓ；ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｂｉｌｉｔｙ；ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ＥＰＲ；ＭＴＳ　癌症是当前严重威胁人类生命的最主要的疾　香豆素是一类广泛分布于伞形科和芸香科植物　中的苯并呲喃酮衍生物，具有抗菌、消炎、抗氧化和抗　肿瘤等生物活性【５Ｊ，已被认定为重要的药物先导化合　病之一，而人体内过量的自由基可导致细胞和组织　器官的损伤，进而诱发癌症及心血管功能障碍等多　种疾病㈣，摄人外源性的抗氧化剂可以在生理上和药　理水平上有效降低或预防癌症的发生［３］。研究表明，作　为抗氧化剂的天然产物如白藜芦醇、大豆异黄酮和黄　芩素可诱导癌细胞的死亡　。因此，兼具自由基清除活　性且抗肿瘤活性的抗氧化剂成为癌症防治的重要　来源。　基金项目：国家自然科学基金（８１４０２８５２）；北京市自然科学基金　（７１５２０１３）；北京市教育委员会科技计划（ＫＭ２０１６１０００５０３１）　物。相关文献表明，香豆素类化合物通过控制血糖和　血脂，抑制过氧自由基功效，抑制脂氧合酶和环氧合　酶花生四烯酸的代谢途径而发挥其抗氧化性功效　；　同时，该类化合物在体内是一类重要的抗癌物质，对　人类肺癌，肾癌及乳腺癌细胞线粒体具有显著的抗增　殖活性，也可通过抑制细胞中Ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１的过量表达来　抑制癌细胞增殖［８１。因此，香豆素所具有的多种药理作　用，如神经保护、抗肿瘤、抗炎作用等均与其抗氧化活　性有关［９－　０１。本研究选择４一甲基及４一三氟甲基取代的　双羟基香豆素类化合物（如图１所示），分别是来源于　作者简介：张娜（１９８ｌ一），女（汉），助理研究员，博士，研究方向：天然　抗氧化剂研究与开发。　张娜，等：香豆素类化合物清除自由基及抗肿瘤活性研究　基础研究　２　ＣＨ－　ｊ．　，ｏＨ　０２ｏ　０　Ｈ　０Ｈ　１ａ　ｌｂ　Ｃｎ　．　＼　／　／０Ｈ　０　Ｈ　０　。　０Ｈ　ＯＨ　２ａ　２ｂ　图１香豆幕化合物的化学结构式　Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　木犀科植物苦枥白蜡树的七叶亭（６，７一二羟基香豆素），　及瑞香属植物长白瑞香的瑞香素（７，８一二羟基香豆素）　的衍生物，采用电子顺磁共振方法（ＥＰＲ）及细胞增殖试　剂盒（Ｍ１’Ｓ）ｉ贝０定化合物清除ＤＰＰＨ自由基的能力及抗　弧　肿瘤细胞增殖活性，以探究两类化合物的清除自由基　能力及抗肿瘤活性，为具有癌症防治功能的天然产物　抗氧化剂的开发利用提供理论基础和试验依据。　１材料与方法　１．１材料与仪器　６，７一二羟基一４一甲基香豆素（１ａ）、７，８一二羟基一４一　甲基香豆素（１ｂ）：百灵威公司；６，７一二羟基一４一三氟甲　基香豆素（２ａ）、７，８一二羟基一４一三氟甲基香豆素（２ｂ）：　以１，２，４一苯三酚，１，２，３一苯三酚及三氟乙酰乙酸乙酯　为原料：北京工业大学分析测试中心自制“　；２，２一联　苯基一１一苦基肼基（ＤＰＰＨ）：美国Ｓｉｇｍａ公司；无水甲　醇（一级色谱纯）：天津四友精细化学品有限公司；ＭＴＳ　试剂盒：北京庄盟国际生物基因科技有限公司；人肺　癌细胞Ａ５４９细胞株：上海华瑞生物科技有限公司。　Ａ一３００电子顺磁共振仪：德国Ｂｒｕｋｅｒ公司；　ＥｎＳｐｉｒｅ酶标仪：美国ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ公司。　１．２方法　１．２．１化合物溶液配置　香豆素溶液配制：分别准确称取０．００９　６　ｇ化合物１ａ　与１ｂ和０．０１２　３　ｇ化合物２ａ与２ｂ，使用无水甲醇溶解并　定容于５０ｍＬ容量瓶，配制成浓度为１　ｍｍｏｌ／Ｌ储备液。　Ｖ。溶液配制：准确称取０．００８　８　ｇＶ　，使用去离子　水溶解并定容于５０　ｍＬ容量瓶，配制成浓度为１　ｍｍｏｌ／Ｌ　储备液。使用去离子水将溶液稀释为２０、４０、６０、８０、　１００、１２０、１４０　Ｉｘｍｏｌ／Ｌ的使用液。　ＤＰＰＨ溶液配制：准确称取ＤＰＰＨ固体粉末　０．０７１　０　ｇ，用无水甲醇溶解并定容于１００　ｍＬ容量瓶，　配制成１．８０　ｍｍｏ１］Ｌ　ＤＰＰＨ储备液，冷藏避光保存。准　确移取５　ｍＬ储备液于５０　ｍＬ容量瓶，用无水甲醇定容　至刻度，配制成０．１８０　ｍｍｏｌ／ＬＤＰＰＨ使用液，使用液需　现用现配。　１－２．２　ＤＰＰＨ自由基清除能力测定　使用无水甲醇将１　ｍｍｏｌ／Ｌ储备液稀释为０、５、ｌ０、　２０、４０、６０、８０、１００￣ｍｏｌ／Ｌ的使用液。取不同浓度的香　豆素化合物按照表１进行加样，反应３０　ｍｉｎ后用５０　毛细管吸取一定量反应混合液装入保护管，置于谐振　腔中进行测谢旧。ＥＰＲ仪器所采用的参数为：中心磁场　３　５２４．９７０　Ｇ；扫场宽度２００．０００　Ｇ；微波频率９．８４２　ＧＨｚ；　微波功率２０．１７　ｍＷ；调制频１００　ｋＨｚ；调制幅度２．００　Ｇ。　以谱图中３　５０７　Ｇ处峰高表示ＤＰＰＨ自由基的强度，　按公式１计算化合物对ＤＰＰＨ自由基的清除率。　表１　ＥＰＲ试验加样表　Ｔａｂｌｅ　１　Ｓａｍｐｌｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ＥＰＲ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　清除率／％＝（１一｝）×１０ｏ　（公式１）　式中：，ｌ为未加化合物时ＤＰＰＨ原始信号强度，使　用无水甲醇代替样品液；，２为加人化合物后ＤＰＰＨ的　信号强度。　１．２．３抗肿瘤细胞增殖活性测定　使用ＲＰＭＩ１６４０培养基将１　ｍｍｏｌ／Ｌ储备液稀释　为１０、２０、４０、６０、８０、１００、１２０、２４０￣ｍｏｌ／Ｌ的待测液。　将处于对数生长期的肺癌细胞配成细胞悬液，以每孔　７　５００个细胞的量接种到９６孔板内。在３７℃，５％ＣＯ：　条件下孵育培养２４　ｈ，设置阴性对照３孔，将含有不同　浓度的香豆素化合物的待测液处理Ａ５４９细胞２４　ｈ。　药物作用２４　ｈ后，每孔加人１Ｏ　ＭＴＳ试剂，继续培　养２　ｈ，终止培养，用酶标仪在４５０　ｎｍ波长下测定其吸　光度值，并按公式２计算化合物对肺癌细胞Ａ５４９的　增殖抑制率绘制曲线。　增殖抑制率　＝（１一　上，２　）×１００　（公式２）　式中：Ｄ．为未加待测物时的ＯＤ值，使用培养基　代替样品液；Ｄ　为加人待测物时的ＯＤ值。　２结果与分析　２．１香豆素化合物及Ｖ　清除ＤＰＰＨ自由基的能力　运用ＥＰＲ方法对不同浓度的化合物及Ｖ　进行测　试。以磁场强度为横坐标，信号强度为纵坐标绘制化　合物清除ＤＰＰＨ自由基的电子顺磁共振波谱图。以化　基础研究　张娜，等：香豆素类化合物清除自由基及抗肿瘤活性研究　合物１ａ和Ｖ　为例，如图２所示。　４０　—　３Ｏ　２Ｏ　ｌ０　０　一’…　～　一４Ｏ　３　７８０　３　５ｏｏ　３　５２０　３　５４０　磁场强度／Ｇ　１０ｏ　８０　６ｏ　２　４０　２０　０　Ａ　Ａ　霞　一２Ｏ　Ｖ　妲　一４Ｏ　一６ｏ　－８０　—１０ｏ　３　７８０　３　５０ｏ　３　５２０　３　５４０　磁场强度／Ｇ　图中浓度单位为ｐ．ｍｏｌ／Ｌ。　图２不同浓度的化合物ｌ、僻　姆醐钽皿｝Ｉｄｄ盆　ａ及ｖｃ清除ＤＰＰＨ自由基的电子顺磁　共振波谱图　Ｆｉｇ．２　ＥＰＲ　ｓｉｇｎａｌｓｏｆＤＰＰＨ　ｒａｄｉｃａｌｓ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇｆｏｒｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｌａ　ａｎｄ　Ｖｃ　由图２可知，ＤＰＰＨ自由基特征峰中心磁场均在　３　５０７　Ｇ，自由基波谱信号强度均随化合物浓度的增加　而显著减小，说明化合物的浓度越大对ＤＰＰＨ自由基　的清除作用越强。进一步分析可知，化合物ｌａ在浓度　大于２０￣ｍｏｌ／Ｌ后信号锐减，浓度为６０￣ｍｏｌ／Ｌ时信号　强度趋于零，说明化合物ｌａ对ＤＰＰＨ自由基的清除能　力较强。　香豆素化合物的清除自由基能力通过自由基清　除率的ＥＣ∞值体现，ＥＣ，。值越小，则清除能力越高。以　ＤＰＰＨ自由基清除率（％）对化合物浓度（Ｉ￣ｍｏｌ／Ｌ）作图，　见图３。　粪　冀　皿　藿　由图３可知，在一定浓度范围内，ＤＰＰＨ自由基清　除率随浓度化合物的增加而逐渐升高。化合物ｌａ与化　合物ｌｂ，２ａ，２ｂ分别在０－２０｝，ｍｏｌ／Ｌ和Ｏ一４０　ｔ￣ｍｏｌ／Ｌ　内，清除率显著升高，６０　Ｉｘｍｏｌ／Ｌ的化合物ｌａ与　０　２Ｏ　４０　６Ｏ　８０　１０ｏ　浓度／（￣ｍｏｌ／Ｌ）　鬟　碧　容　Ｏ　２Ｏ　４０　６Ｏ　８Ｏ　１００　浓度／（￣ｍｏｌ／Ｌ）　蓬　望　塞　０　２Ｏ　４Ｏ　６Ｏ　８Ｏ　ｌ００　浓度／（Ｉ￣ｍｏｌ／Ｌ）　１　旃　蜒　醐　丑　皿　壬　台　Ｏ　２０　４Ｏ　６Ｏ　８Ｏ　１ｏｏ　１２０　ｌ４Ｏ　浓度／（￣，ｍｏｌ／Ｌ）　图３香豆素化合物及Ｖｃ对ＤＰＰＨ自由基的滑除率与浓度关系　Ｆｉｇ．３　Ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ＤＰＰＨ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ａｎｄ　Ｖｃ　８Ｏ　ｔＬｍｏｌ／Ｌ的化合物１ｂ，２ａ，２ｂ自由基清除效果相当，　且清除率接近１００％。这与波谱图的变化趋势是一致　的。结果通过计算得出：４种香豆素化合物（１ａ、１ｂ、２ａ、　２ｂ）及ｖ　清除ＤＰＰＨ自由基的ＥＣ５０值（ＤＰＰＨ起始强　度减少５０％时所对应的清除剂浓度）分别为：９．０４、　３７．３２、３４．６Ｏ、２９．３３、４２．４４　ｐ，ｍｏｌ／Ｌ，清除能力依次为：化　合物ｌａ＞２ｂ＞２ａ＞ｌｂ＞Ｖ　。说明４种香豆素类化合物清　除ＤＰＰＨ自由基的能力优于天然抗氧化剂ｖ　。　２．２香豆素化合物及Ｖ　抑制Ａ５４９细胞的增殖能力　运用ＭＴＳ方法，对不同浓度的４个化合物及Ｖ　张娜，等：香豆素类化合物清除自由基及抗肿瘤活性研究　基础研究　进行抗肿瘤细胞Ａ５４９增殖活性测试。以增殖抑制率　（％）对化合物浓度（￣ｍｏｌ／Ｌ）作图，见图４。　萋　霎　浓度／（￣ｍｏｌ／Ｌ）　熏　浓度／（￣ｍｏｌ／Ｌ）　要　浓度／（￣ｍｏｌ／Ｌ）　谆　纂　嚣　磐　浓度／（￣ｍｏｌ／Ｌ）　磊　器　磐　浓度／（ｐ．ｍｏｌ／Ｌ）　图４化合物对肿瘤细胞Ａ５４９增殖的抑制率与浓度的关系　Ｆｉｇ．４　Ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ａ５４９　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　由图４可知，不同的香豆素衍生物作用于Ａ５４９　细胞２４　ｈ后，对Ａ５４９细胞均有不同程度的抑制作用，　且随着香豆素衍生物浓度的增加，其增殖抑制率也在　逐渐上升，说明化合物的浓度越大对Ａ５４９细胞的增　值抑制能力越强。进一步分析可知，不同化合物对　Ａ５４９细胞的抗增殖作用随浓度变化趋势不同，化合物　１ａ、１ｂ、２ａ的浓度到达１００　ｐ￣ｍｏｌ／Ｌ时，对Ａ５４９细胞抗　增值作用已经接近于８０％且趋于平缓；而只有化合物　２ｂ浓度为８０￣ｍｏｌ／Ｕ时其抑制率已经超过８Ｏ％，故化　合物２ｂ具有良好的抑制肿瘤细胞的作用。　香豆素化合物的抗肿瘤活性可通过增值抑制率　的Ｉｃ∞值体现，抗肿瘤活性越高，Ｉｃ∞值越小。通过对　比发现：４种香豆素化合物（１ａ、１ｂ、２ａ、２ｂ）的抗肿瘤活　性分别为：３８．４８、３３．５３、３１．６６、２１．７６￣ｍｏｌ／Ｌ；而Ｖｃ的抗　肿瘤活性＞１００　Ｉｘｍｏｌ／Ｌ，这与已报到的文献相一致［１３　４】。　抗肿瘤活性的强弱依次为：化合物２ｂ＞２ａ＞ｌｂ＞ｌａ＞Ｖ　；　同时，吸电子基团ＣＦ　取代香豆素衍生物抗肿瘤细胞　增值活性优于ＣＨ　取代香豆素衍生物。　３结论　运用电子顺磁共振和ＭＴＳ两种方法分别对香豆　素化合物的自由基清除能力及抗肿瘤活性进行测定。　试验结果表明，双羟基香豆素类化合物不仅对ＤＰＰＨ　自由基具有较好的清除能力，而且对肿瘤细胞的增殖　具有一定的抑制活性，且均与香豆素的浓度呈正相关　性。此试验中的香豆素化合物清除ＤＰＰＨ自由基能力　及抗肿瘤细胞增殖活性均优于Ｖ　，其中自由基清除能　力最强为化合物ｌａ（ＥＣ∞＝９．０４　Ｉｘｍｏｌ／Ｌ），抗肿瘤活性　最好的是化合物２ｂ（ＩＣ∞＝２１．７６　Ｉｘｍｏｌ／Ｌ），该研究为具　有癌症防治功能的天然产物抗氧化剂的开发利用提　供试验依据。　总之，从天然植物中寻找天然抗氧化剂取代合成　抗氧化剂是食品行业的发展趋势，具有治疗作用的天　然抗氧化剂也将是现代医药、保健行业的发展方向。　因此，基于天然植物，筛选和开发抗氧化作用确切、安　全无毒的新品种或分离提取其有效抗氧化成分，并针　对其抗氧化机理、协同作用、构效关系和分子设计等　方面开展深入研究，将为天然抗氧化剂的应用开发奠　定理论基础和指导思路。　参考文献：　【１］１　Ｂｕｂｏｌｓ　ＧＢ，Ｖｉａｎｎａ　Ｄｄａ　Ｒ，ｍｏｌ／Ｌｅｄｉｎａ－Ｒｅｍｏｎ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ａｎｔｉｏｘ—　ｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ａｎｄ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ［Ｊ］．ｍｏｌ／Ｌｉｎｉ—Ｒｅｖｉｅｗｓ　ｉｎ　ｍｏｌ／Ｌｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１３，１３（３）：３１８－３３４　基础研究　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１６．０１．００２　食品研究与并发　Ｆｏｏｄ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎ　２０１６年１月　第３７卷第１期　乳化剂对芝麻酱稳定性的影响　毕海燕，邵悦。马勇　（渤海大学化学化工与食品安全学院，辽宁锦州１２１０００）　摘　要：分析芝麻酱长期放置后分层、板结现象的原因，研究乳化剂的加入方法以及乳化剂的配比对芝麻酱稳定性的　影响。蔗糖酯与单甘酯复配后的乳化效果好于二者单独使用的乳化效果，蔗糖酯：单甘酯＝２：３的复合乳化剂的乳化效　果最好，乳化溶液透光率为６８．３％；复合乳化剂与芝麻酱中油脂的质量比为３．５０％，乳化效果最好，乳化溶液透光率为　７２．１％；向芝麻中加入复合乳化剂，再研磨成芝麻酱，其上浮指数（Ｏ．０１％）小、稳定性大，呈棕黄色，放置１００ｄ未析油；而　向芝麻酱中加入复合乳化剂的酱体发灰，其上浮指数（ｎｌｌ％）大、稳定性小，放置６０ｄ后出现析油、麻渣板结现象。　关键词：芝麻酱；稳定性；复合乳化剂；添加方式　Ｔｈｅ　Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　Ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｓｅｓａｍｅ　Ｐａｓｔｅ　ＢＩ　Ｈａｉ－ｙａｎ，ＳＨＡＯ　Ｙｕｅ，ＭＡ　Ｙｏｎｇ　（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ａｎｄ　Ｆｏｏｄ　Ｓａｆｅｔｙ，Ｂｏｈａｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎｚｈｏｕ　１２１０００，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，　Ｃｈｉｎａ）　基金项目：辽宁省教育厅重点实验室项目（２００９Ｓ００４）；辽宁省高校重大科技平台“食品贮藏加工及质量安全控制工程技术研究中心”与“辽宁省　食品安全重点实验室”开放课题（ＬＮＳＡＫＦ２Ｏｌ　１０２７）　作者简介：毕海燕（１９６９一），女（汉），副教授，本科，研究方向：食品资源开发与利用。　通信作者：马勇（１９６Ｏ一），男（回），教授，博士，研究方向：食品资源开发与利用。　【２】Ｚｈａｎｇ　ＫＹ，Ｄｉｎｇ　ＷＸ，Ｓｕｎ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｎｄ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉ—　ｔｉｅｓ　ｏｆ　４－ａｒｙｌｃｏｕｍａ　ｔｉｎｓ　ａｎｄ　４－ａｒｙｌ－３，４－ｄｉｈｙｄｒｏｃｏｕｍａｒｉｎｓ［Ｊ】＿　Ｂｉｏｃｈｉｍｉｎｅ，２０１４，１０７：２０３－２１０　ｉｃａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ１．Ｃｕｒｒｅｎｔ　ｍｏ１］Ｌｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｙ，２００５，１２（８）：ｒ８８７—　９１６　【９】Ｆｙｌａｋｔａｋｉｄｏｕ　ＫＣ，Ｌｉｔｉｎａｓ　ＫＥ，Ｈａｄｊｉｐａｌｏｕ—Ｌｉｔｉｎａ　ＤＪ．Ｎａｔｕｒａｌ　ａｎｄ　ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ　ｗｉｔｈ　ａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ／ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃ—　【３］　Ｕ　ＪＷ，Ｌｉｕ　ＹＦ，Ｆａｎ　ＬＰ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａ—　ｒｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｆｒｕｉｔｉｎｇ　ｂｏｄｉｅｓ　ｏｆ　Ｚｉｚｙｐｈｕｓ　Ｊｕｊｕｂａ　ｃｖ．Ｊｉｎｓｉｘｉａｏｚａｏ［Ｊ】．　ｔｉｖｉｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｄｅｓｉｇｎ，２００４，１０（３０）：３８１３—　３８３３　Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ　Ｐｏｌｙｍｅｒｓ，２０１　１，８４（１）：３９０—３９４　［４】Ｆｏｘ　ＪＴ，Ｓａｋａｍｕｒｕ　Ｒ，Ｈｕａｎｑ　Ｒ，ｅｔ　ａ１．Ｈｉｇｈ—ｔｈｒｏｕｓｈｐｕｔ　ｇｅｎｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ａｓｓａｙ　ｉｄｅｎｔｉｉｆｅｓ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ　ａｓ　ｉｎｄｕｃｅｒｓ　ｏｆ　ＤＮＡ　ｄａｍａｇｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　［１０］Ｂｅｉｌｌｅｒｏｔ　Ａ，Ｄｏｍｉｎｇｎｅｚ　ＪＣ，Ｋｉｒｓｃｈ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｏｕｍａｒｉｎ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ａｎｄ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ叨．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｕｎｉｔｅｄ　Ｓｔａｔｅｓ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａ，２０１２，１０９（１４）：５４２３—５４２８　【５］ｍｏｌ／Ｌａｎｏｊｋｕｍａｒ　Ｐ，Ｒａｖｉ　ＴＫ，Ｇｏｐａｌａｋｒｉｓｈｎａｎ　Ｓ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｎｄ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｆ　ａｒｙｌａｚｏｐｙｒａｚｏｌｅｓ　ａｎｄ　ａｒｙｌｈｙｄｒａｚｏｎｏｐｙｒａ—　ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ［Ｊ］．Ｂｉ￣ｒｎｉｇｃ＆ｍｏＹＬｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｙｒ　Ｌｅｔｔｅｒｓ，２００８，　１８（３）：１１０２－１１０５　［１１】张娜，陈文娟，张凤娟，等．氟代７一羟基香豆素化合物在蛋白激酶　抑制剂或，和抗肿瘤药物中的应用［Ｐ］．公布号：ＣＮ１０４６０６１８６Ａ，　公布日期：２０１５．０５．１３　［１２】周碉，张娜，林太风，等．柠檬汁清除ＤＰＰＨ自由基能力及实验方　法比较研究［Ｊ】＿食品工业科技，２０１２，３３（１６）：１７６—１８２　［１３】Ｃｈｅｎ　Ｑ，Ｅｓｐｅｙ　ｍｏＹＬＧ，Ｓｕｎ　ＡＹ，ｅｔ　ａ１．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ　ｄｏｓｅｓ　ｏｆ　ａｓｃｏｒｂａｔｅ　ａｃｔ　ｓ　ａｐｒｏｏｘｉｄａｎｔ　ｎｄ　ｄｅｃｒａｅａｓｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ａｇｇｒｅｓｓｉｖｅ　ｔｕｍｏｒ　ｚｏｌｏｎｅｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｃｏｕｍａｒｉｎｍｏｉｅｔｙ［Ｊ］．Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｍｏｌ／Ｌｅｄｉｃ—　ｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００９，４４（１　１）：４６９０－４６９４　【６］Ｋｏｓｔｏｖａ　Ｌ，Ｂｈａｔｉａ　Ｓ，Ｇｒｉｑｏｒｏｖ　Ｐ，ｅｔ　１．Ｃｏｕｍａｒｉａｎｓ　ａｓ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ［Ｊ］．　Ｃｕｒｒｅｎｔ　ｍｏｌ／Ｌｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｙ，２０１１，１８（ｒ２５）：３９２１—３９５１　【７】Ｆｉｑｕｅｒｏａ—ｇｎｉｎｅｚ　Ｒ，ｍｏｌ／Ｌａｔｏｓ　ｍｏｌ／ＬＪ，Ｖａｚｑｕｅｚ—Ｒｏｄｒｉｑｕｅｚ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．　Ｉｎｔｅｒｅｓｔ　ｏｆ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｇｅｎｔｓ　ｉｎ　ｐａｒａｓｉｔｉｃ　ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｔｈｅ　ｃａｓｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ　ｉｎ　ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　ｃｏｕｍａｒｉｎｓ［Ｊ］．Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｔｏｐｉｃｓ　ｉｎ　ｍｏｌ／Ｌｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１５，１５　ｏｆｔｈｅ　Ｕｎｉｔｅｄ　Ｓｔａｔｅｓ　ｏｆＡｍｅｒｉｃａ，２００８，１０５（３２）：１１１０５—１１１０９　（９）：８５０－８５６　【８】Ｂａｒｇｅｓ　Ｒｏｌｅｉｒａ　Ｆ，ｍｏｌ／Ｌｉｌｈａｚｅｓ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．Ｓｉｍｐｌｅ　ｃｏｕｍａｒｉｎｓ　ａｎｄ　ａｎａｌｏｇｕｅｓ　ｉｎ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ，ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｎｄ　ａｂｉｏｌｏｇ－　［１４】荆晓娟，杜冀晖，贺克俭．维生素ｃ在肿瘤治疗中的作用研究进　展［Ｊ］．医学综述，２０１０，１６（４）：５５４—５５７　收稿日期：２０１５—０９—０９