李雯雯;苏乔;赵广银;李武国;付强;李文英;黄浩机;徐耀基
【摘 要】为动物实验教学和相关研究提供参考资料,本研究选用健康,体重25~30 kg实验用巴马小型猪52头,用监护仪、血气分析仪、全自动生化分析仪、动物血液分析仪系统地测定巴马小型猪术前心率、动脉血压、动脉血气、血清生化、血液生理学等多项生理生化指标.试验结果显示,巴马小型猪麻醉状态常规生理生化指标大多数呈正态分布,仅有SABP、DABP、MAP、PaO2、Na+、PLT、TP和TBIL呈偏态分布.进一步比较发现,巴马小型猪在手术前的部分生理指标与人类正常参考值相似,表明巴马小型猪和人类生理、生化特性有一定的相似性,对实验动物的手术教学与比较医学研究有一定的参考意义. 【期刊名称】《中国兽医杂志》 【年(卷),期】2018(054)008 【总页数】5页(P113-117)
【关键词】巴马小型猪;血气分析;血压;血清生化指标;血液学指标 【作 者】李雯雯;苏乔;赵广银;李武国;付强;李文英;黄浩机;徐耀基
【作者单位】中山大学附属第一医院动物实验中心,广东 广州 510080;中山大学附属第一医院动物实验中心,广东 广州 510080;中山大学附属第一医院动物实验中心,广东 广州 510080;中山大学附属第一医院动物实验中心,广东 广州 510080;佛山科学技术学院生命科学与工程学院,广东 佛山 528231;中山大学附属第一医院动物实验中心,广东 广州 510080;中山大学附属第一医院动物实验中心,广东 广州 510080;广州市宠物研究中心,广东 广州 510640
【正文语种】中 文 【中图分类】S857.12+4
近年来小型猪在医学、教学及试验研究中应用越来越广泛,其中我国广西巴马小型猪属于近交选育品种,具有体形矮小、个体整齐、性情温顺等优点,是较为理想的大型实验动物,并且相关的品系资料较丰富。小型猪麻醉后手术前的血压、血气、血液生理、生化等指标的基础值对围术期的生理指标有对照作用,对围术期的麻醉管理和液体管理有指导性意义,但有关小型猪麻醉状态下的一些生理生化指标报道较少,且各地报道不尽一致。本试验系统地测定巴马小型猪麻醉状态下心率、动脉血压、动脉血气、血清生化、血液生理学等多项生理生化指标,旨在为教学和相关研究提供参考。 1 材料与方法
1.1 主要仪器与试剂 7020型全自动生化分析仪,日本日立公司生产;i-STAT1便携式血气分析仪,美国雅培公司生产;麻醉呼吸机,美国马特公司生产;动物血液细胞分析仪BC-5300Vet和心电监护仪IPM12Vet,深圳迈瑞公司生产;i-STAT EG7+ 血气测试片,美国雅培公司生产;溶血素和稀释液,深圳迈瑞公司生产。 1.2 实验动物 质量合格的25~30 kg实验用巴马小型猪52只,雌雄不限,购自南方医科大学实验动物中心。试验前禁食12 h,不禁水。
1.3 麻醉与保定 耳后肌肉注射阿托品0.05 mg/kg·bw、舒泰1.5~1.7 mg/kg·bw和盐酸噻拉嗪2.2 mg/kg·bw(速眠新Ⅱ)进行麻醉诱导。备皮,行气管内插管,并连接麻醉呼吸机。呼吸机设置潮气量(Vt)10 mL/kg·bw,呼吸频率15 bpm,氧流量1 L/min,异氟烷吸入浓度为1.5%维持麻醉。行仰卧保定,同时连接心电监护仪及呼吸传感器。
1.4 颈总动脉插管 颈部气管旁1 cm纵向切开皮肤3~5 cm,用组织钳分离一侧颈总动脉约3 cm长。取动脉插管,末端与三通相连,抽取25 IU肝素水充满插管备用。结扎颈总动脉远心端,用动脉夹夹闭近心端。在动脉夹和结扎处之间近结扎线处将颈总动脉剪一小斜口(45 o角)。向近心端插入充有肝素的动脉插管并固定,连接监护仪有创压力传感器监测动脉血压。
1.5 血样采集和血气、血液生理、生化指标测定 使用注射器经动脉插管抽取血样。1 mL血液用于血气检测,使用前弃去注射器头端2~3滴血后,按标准操作规程注入EG7+血气测试片用血气分析仪测定血气指标,血液样本测试前需轻轻混匀;5 mL血液注入促凝采血管,待血液充分凝固后离心分离血清,用于生化检测;2 mL血液注入EDTA抗凝采血管,用于血常规检测。
1.6 数据处理 试验数据用SPSS 19.0统计软件进行处理分析,对试验数据进行正态性检验,如呈正态分布,则其95%参考值范围用公式表示;如呈偏态分布,则其95%参考值范围用百分位数法P2.5和P97.5表示。 2 结果与分析
2.1 心率、血压测定结果与分析 对心率、动脉收缩压、动脉舒张压、平均动脉压进行正态性检验,心率的数据结果P>0.05,呈正态分布,因此,其95%参考值范围用公式计算,结果见表1;动脉收缩压、动脉舒张压、平均动脉压的正态性检验结果P<0.05,资料呈偏态分布,因此其95%参考值范围选用百分位数法P2.5和P97.5计算,结果见表2。
表1 心率95%参考值范围计算表项目P值均数( x)标准差(S)参考值范围( x±1.96S)心率HR(bpm)0.62482.0216.4949.7~114.34
表2 动脉收缩压、动脉舒张压、平均动脉压95%参考值范围计算表项目P值中位数(M)四分位间距(Q)参考值范围动脉收缩压SABP(mmHg)0.0018637.5071~140动脉舒张压DABP(mmHg)0.0156231.2542.08~108.6平均动脉压
MAP(mmHg)0.00168.531.051~109.85
2.2 动脉血气、血液离子的指标测定结果与分析 对pH 值、HCO3-、BE、K+、TCO2、Ca2+、PaCO2进行正态性检验,结果P>0.05,呈正态分布。因此,其95% 参考值范围用公式计算,结果见表3;PaO2 、Na+ 正态性检验结果P<0.05,资料呈偏态分布,因此其95%参考值范围选用百分位数法P2.5和P97.5计算,结果见表4。
表3 pH 值、HCO3-、BE、K+、TCO2、Ca2+、PaCO2 95%参考值范围计算表项目P值均数( x)标准差(S)参考值范围( x±1.96S)pH值0.3317.580.117.36~7.80HCO3-(mmol/L)0.85932.122.4627.3~36.94BE
(mmol/L)0.18110.152.934.41~15.89K+( mmol/L)0.0513.630.372.9~4.36TCO2(mmol/L)0.32533.262.6228.12~38.4Ca2+(mmol/L)0.7791.340.081.18~1.5PaCO2 (mmHg)0.05334.747.0820.86~48.62
表4 PaO2 、Na+ 95%参考值范围计算表项目P值中位数(M)四分位间距(Q)参考值范围PaO2 (mmHg)0.000536.5107334.4~595.1Na+ (mmol/L)0.027140.05.0135.0~148.8
2.3 血常规测定结果与分析 对WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、MPV进行正态性检验,结果P>0.05,呈正态分布。因此,其95%参考值范围用公式计算,结果见表5;PLT正态性检验结果P<0 .05,资料呈偏态分布,因此其95%参考值范围选用百分位数法P2.5和P97.5计算,结果见表6。
表5 WBC、RBC、HGB、HCT、MCV 、MCH 、MCHC 、MPV 95%参考值范围计算表项目P值均数( x)标准差(S)参考值范围( x±1.96S)WBC
(109/L)0.36615.084.256.74~23.41RBC (1012/L)0.1817.050.985.14~8.96HGB (g/L)0.157123.0911.05101.43~144.74HCT
(%)0.27839.953.7032.70~47.20MCV (fL)0.32857.554.1849.36~65.74MCH (pg)0.36517.761.6314.56~20.95MCHC (g/L)0.927308.3210.82287.11~329.52MPV (fL)0.8979.210.787.68~10.74
表6 PLT 95%参考值范围计算表项目P值中位数(M)四分位间距(Q)参考值范围PLT (109/L)0.005353.5179.5243.13~577.88
2.4 血液生化指标测定结果与分析 对反应肝、肾功能的血液生化指标Urea、ALT、ALP、ALB、LDH 、Cr、AST、GGT、TP、TBIL进行正态性检验,Urea、ALT、AlkP、AlbG、LDH 、Cr、AST、GGT 的数据结果P>0.05,呈正态分布,因此,其95%参考值范围用公式计算,结果见表7;TP、TBIL正态性检验结果P<0 .05,资料呈偏态分布,因此其95%参考值范围选用百分位数法P2.5和P97.5计算,结果见表8。
表7 Urea、ALT、ALP、ALB、LDH 、Cr、AST、GGT 95%参考值范围计算表项目P值均数( x)标准差(S)参考值范围( x±1.96S)Urea
(mmol/L)0.7504.981.232.56~7.40ALT (U/L)0.32760.6315.1630.92~90.34ALP (U/L)0.10689.6030.6429.54~149.65ALB
(g/L)0.20233.314.3724.75~41.87LDH (U/L)0.562563.36113.13341.63~785.09Cr (μmol/L)0.36264.2612.7739.23~89.29AST
(U/L)0.06648.7617.1815.09~82.43GGT (U/L)0.33070.7215.6340.09~101.35 表8 TP、TBIL95%参考值范围计算表项目P值中位数(M)四分位间距(Q)参考值范围TP (g/L)0.00067.757.1542.44~79.0TBIL (μmol/L)0.0001.201.900.3~3.6 2.5 与其他文献报道的比较 本试验结果(平均数±标准差)与其他文献报道的小型猪血压、心率、血气、血液生理、生化指标的比较分别见表9~表13。 表9 心率及动脉血压的比较项目A组B组C组人的正常参考值HR(bpm)82.02±16.49138.20±28.30100.0±13.060~
100MAP(mmHg)72.74±17.58124.30±27.50119.0±11.070~105SABP(mmHg)94.95±20.23-161.0±11.090~140DABP(mmHg)65.95±18.22-102.0±10.060~90
A组:本试验 ;B组:巴马小型猪(黄国勇,2012)[1] ;C组:蕨麻小型猪(龚宝勇,2016) [2]
表10 动脉血气分析的比较项目A组B组C组人的正常参考值pH7.58 ±0.117.38±0.157.48 ± 07.35~7.45HCO3-(mmol/L)32.12±2.46-28 ± 121~27BE (mmol/L)10.15±2.932.3±0.634 ± 1-3~3PaCO2
(mmHg)34.74±7.0839.2±5.638 ± 135~45PaO2 (mmHg)513.23±68.73408.4 ± 102.095 ± 280~100
A组:本试验 ;B组:巴马小型猪(黄国勇,2012)[1] ;C组:杂种长白猪(Wollborn J,2018)[3]
表11 血液离子含量的比较项目A组B组C组人的正常参考值K+ ( mmol/L)3.63±0.37 4.1±0.54.04±0.373.50~5.50Ca2+ (mmol/L)1.34±0.081.3±0.1-2.0~2.5Na+
(mmol/L)140.13±3.63138.4±3.7139.60±9.50135.0~150.0
A组:本试验 ;B组:巴马小型猪(黄国勇, 2012)[1] ;C组:大白猪( Canedo BF,2015) [4]
表12 血液生理指标的比较项目A组B组C组人的正常参考值WBC (109/L)15.08±4.2523.66±0.9519.38±3.924.0~ 10.0RBC (1012/L)7.05±0.987.70±0.098 .92±0.643.90~5.90HGB (g/L)123.09±11.05139. 3±2 169.50±12 .51 116~179HCT
(%)39.95±3.743±151 .31±3.9237~52MCV (fL)57.55±4.1855. 99±0.
6157 .49±2.0180.0~ 98.0MCH (pg)17.76±1.6318.08±0.2418.94±0.7927.2~
34.3MCHC (g/L)308.32±10.82322.7±1.5330 .46±4.92272~ 343MPV (fL)9.21±0.789. 24±0.155 .25±0.686.5~12 .5PLT
(109/L)377.25±102.46599.3±26.1415.39±83 .2799.0~ 303 .0
A组:本试验 ;B组:巴马小型猪(王爱德, 2001)[5] ;C组:巴马小型猪(杨述林, 2007)[6]
表13 血清生化指标的比较项目A组B组C组人的正常参考值Urea
(mmol/L)4.98±1.239. 60±0. 822. 30±0. 972.9~8.6ALT (U/L)60.63±15.1649. 00±1. 6245. 8±10. 51~ 40ALP (U/L)89.60±30.64297±22-30~120ALB (g/L)33.31±4.3739. 67±1. 1 40. 1±7. 335~50LDH (U/L)563.36±113.13502±14413. 8±98. 4114~240Cr (μmol/L)64.26±12.7793. 12±9. 0686. 0±18. 353~115AST
(U/L)48.76±17.1837. 32±2. 6928. 9±12. 01~37GGT (U/L)70.72±15.6380. 36±4. 91-2~50TP (g/L)66.90±6.6171. 23±0. 9677. 8±10. 664~87TBIL (μmol/L)1.55±1.032. 64±0. 15-3~22
A组:本试验 ;B组:巴马小型猪(王爱德,2001)[7] ;C组:巴马小型猪(赵玉琼,2017)[8] 3 讨论
在小型猪外科手术前进行常规生理生化指标的基础值测定,对术中麻醉管理及补液管理有非常重要的指导意义。但小型猪麻醉状态下与正常清醒状态下测定的值可能有一定差别,特别在动脉血气及心率、血压等指标有可能差异较大,并且由于实验猪品种不一样,参考值也可能有差异。以往文献中对各种小型猪的心率、血压、血液生理生化指标报道较多,但多为小型猪在清醒时的正常值,在麻醉状态下的基础值鲜有报道,特别小型猪的动脉血气资料最少。因此,本试验有必要对巴马小型猪术前的重要参考指标进行系统的测定,确定参考值范围,弥补相关资料的不足。
经过对比研究发现,本试验中小型猪术前HR、MAP都比文献报道的其他小型猪正常值略低,但与人的正常参考值相符,而其他文献报道的小型猪测定值均高于人的正常参考值。这可能与猪的年龄、体重,以及麻醉方法、麻醉深度、不同测量部位有关。
在动脉血气分析试验中,由于本实验用纯氧吸入,因此术前巴马小型猪的PaO2相比其他文献所测的值高很多,通常麻醉中均用纯氧吸入,但持久应用易产生氧中毒及麻醉后肺不张,现先进单位已改用氧浓度40%~50%吸入,更为合理。本试验中的巴马小型猪术前PaCO2与文献相比相差不大,也与人类参考值范围一致。本试验与Wollborn J等文献报道实验猪的pH值都相比人的正常值稍微偏高,而本试验结果显示,巴马小型猪血液较偏碱性,也许与使用纯氧吸入有关,测定值仅供参考,仍有待考究。在电解质的测定值中,K+平均值与其他文献相比稍低,但与人类正常参考值相符,Na+和其他文献报道的实验猪情况基本一致,也在人类正常参考值范围内,Ca2+与黄国勇报道的一致,两者均低于人类参考值范围。 小型猪血液学常规生理生化指标的文献资料相对较多,可供本试验参照的数据也相对较多。本试验所测血液学指标与其他文献报道的测定值相比均普遍偏低,但本试验与其他报道的试验结果都显示,巴马小型猪的血液中RBC、WBC、PLT数量均明显高于人类正常值范围,但HGB与HCT又与人类正常值相似。术前血清ALT、AST含量比文献报道的相对偏高,Urea、ALP明显低于王爱德报道,综合文献与本试验结果发现,AST、ALT、GGT在巴马小型猪血清中的含量偏高于人类参考值范围,LDH则明显超出人类正常参考值范围,TBIL低于人类正常参考值范围,其余指标都与人类相当。表明了巴马小型猪和人类生理、生化特性有一定的相似性,对实验动物的手术教学与比较医学研究有一定的参考意义。 参考文献:
【相关文献】
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