检验医学与临床２０１１年１２月第８卷第２３期 Ｉ ａｂ Ｍｅｄ Ｃｌｉｎ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２０１１，Ｖｏｌ。８，Ｎｏ．２３ ・论 著・ Ｅ４１１电化学发光免疫分析系统性能评价及临床应用 王 焱，杨 娟△，张雪梅（四川省都江堰市人民医院 ６１１８３０） 【摘要】 目的 评价Ｒｏｃｈｅ Ｅ４１１全自动电化学发光免疫分析系统相关性能及临床应用情况。方法 以测定 甲胎蛋白（ＡＦＰ）为例，收集患者高、中、低值新鲜血清混合标本，应用美国临床实验室标准化协会（ＣＬＳＩ）颁布的 ＥＰ１０一Ａ２对Ｅ４１１全自动电化学发光免疫分析系统进行初步评价。结果 通过ｃＩ ＳＩ ＥＰ１０一Ａ２程序评价显示，Ｅ４１１ 检测系统偏差、不精密度都在可接受范围内，也未见交叉污染、线性漂移等因素对精密度有明显影响。结论 Ｅ４１１ 全自动电发光免疫分析系统分析性能可靠，适合临床实验室使用。 【关键词】 电化学发光系统； 免疫分析； 甲胎蛋白 ＤｏＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２—９４５５．２０１１．２３．０２９ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２ ９４５５（２Ｏ１１）２３—２８７２—０２ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｅ４ １ １ ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｅｌｅｃｔｒｏ ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ ｓｙｓｔｅｍ ＷＡＮＧ Ｙａｎ，ＹＡＮＧ Ｊｕａｎ ，ＺＨＡＮＧ Ｘｕｅ—ｍｅｉ（Ｐｅｏｐｌｅ Ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｄｕｊｉａｎｇｙａｎ Ｃｉｔｙ，Ｓｉｃｈｕａｎ ６１１８３０。 Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｏｆ Ｒｏｃｈｅ Ｅ４ １ １ ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｅｌｅｃｔｒｏ ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ ｉｍｍｕ— ｎｏａｓｓａｙ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｋｎｏｗ ｉｔｓ ｓｔａｔｕｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔａｋｅｎ ｔｈｅ ｅｘａｍｐｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｏｎ ｔｈｅ ＡＦＰ。ｗｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｔｈｅ ｍｉｘｅｄ ｆｒｅｓｈ ｓｅｒｕｍ ｓａｍｐｌｅｓ ａｔ ｈｉｇｈ，ｍｅｄｉａｎ，ｌｏｗ ｌｅｖｅｌ，ａｎｄ ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｅｌｅｃｔｒｏ ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ Ｅ４１ １，ｔｈｅ ＣＬＳＩ ｄｏｃｕｍｅｎｔ ＥＰ１０—２Ａ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｉｔｓ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔＯ ｔｈｅ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ＣＬＳＩ ＥＰ１ ０一Ａ２ ｐｒｏｇｒａｍ，ｔｈｅ ｂｉａｓ ａｎｄ ｉｍｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｏｆ Ｅ４ １ １ ｓｙｓｔｅｍ ｗｅｒｅ ａｃｃｅｐｔａｂｉｅ．Ｗｅ ｄｉｄｎ ｔ ｆｉｎｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｏｆ ｃａｒｒｙｏｖｅｒ ａｎｄ ｄｒｉｆｔ ｈａｄ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｐｒｅｃｉｓｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｏｆ Ｒｏｃｈｅ Ｅ４ １ １ ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｃｈｅｍｉｌｕ— ｍｉｎｅｓｃｅｎｔ ｓｙｓｔｅｍ ｉｓ ｒｅｌｉａｂｌｅ ａｎｄ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｔｏ ｕｓｅ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ｅｌｅｃｔｒｏ ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ ｓｙｓｔｅｍ； ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ； ＡＦＰ 近年来，随着生物标记技术的不断进步，免疫分析技术也 １．３方法 常规开机、保养、校准仪器后测定制备样本中ＡＦＰ 浓度，测定顺序如下：中、高、低、中、中、低、低、高、高、中……（前 ４个中值为测定起始用，不记录结果）。每日在同一条件下按上 述步骤进行测定，连续５ ｄ，得高、中、低值数据各ｌ５个。 １．４统计学处理用ＳＰＳＳ１１．５软件按照ＥＰ１０—２Ａ文件要求 由具有放射性污染的放射免疫标记技术发展到非放射免疫标 记技术［１］。电化学发光免疫分析技术（ｅｌｅｃｔｒｏ ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓ ｃｅｎｃｅ，ＥＣＬ）正是这类非放射免疫标记技术的典型代表 ］。本 科２００９年引进了Ｒｏｃｈｅ Ｅ４１１电化学免疫发光分析系统，为验 证该设备的系统性能，在学习理解美国临床实验室标准化协会 （ＣＬＳＩ）ＥＰ１０一Ａ［３ 的基础上，对使用的Ｅ４１ｌ自动免疫分析仪 进行了相关性能评价，以了解临床应用情况。 １材料与方法 进行方法内和方法间离群值检验，计算测定ＡＦＰ偏差、不精密 度等，并将ＣＬＩＡ８８中ＡＦＰ的１／２ＴＥａ作为是否可接受标准。 同时分别将得到的多元回归方程中５个因素（截距、斜率、交叉 污染、非线性、线性漂移）的回归参数进行ｔ检验。 １．１试剂与仪器Ｒｏｃｈｅ Ｅ４１１检测系统由Ｒｏｃｈｅ Ｅ４１１全自 ２ 结 果 动电化学免疫发光分析仪、Ｒｏｃｈｅ原装试剂（批号：００１５６６０７） 与检测程序、Ｒｏｃｈｅ配套校准品（批号：００１５１ｌ９０）、Ｒｏｃｈｅ正常 值（批号：００１５１５２７）和病理值质控（批号：００１５１５２８）血清组成， 该检测系统配套具有溯源性。 １．２混合血清标本分别收集、制备本院门诊及住院患者无 Ｅ４１１检测系统检测ＡＦＰ的标示值与偏差结果见表１，不 精密度值见表２，ＡＦＰ测定线性分析见图１。最后将５ ｄ测定 的数据导入ＳＰＳＳ１１．５按ＥＰ１０ ２Ａ要求处理数据，得出结果 见表３。 ／ｔ 明显溶血、脂血和黄疸的新鲜血清样本，其浓度分布按照ＥＰ９— ／／／ ／ ，， ／／ ２Ａ＿４ 高、中、低值分布要求分别制成高、中、低值３组血清， １ ５００×ｇ离心５ ｍｉｎ弃沉淀，混匀后按每管２００ Ｉ 进行分装， 在仪器质控运行正常条件下３组血清分别测定甲胎蛋白 （ＡＦＰ）浓度２Ｏ次，测出每组血清的ＡＦＰ均值作为该组血清的 标示值，标准差作为最大可允许误差时计算的标准麓。余下血 清置于一２０℃保存以便备用。 ／ ＿／／ ，／ｌ ｛蕾示值 图１ Ｅ４１１系统检测ＡＦＰ线性图 通讯作者，Ｅ—ｍａｉｌ：７６１２７６５１１＠ｑｑ．ｃｏｒｎ。 检验医学与临床２０１１年１２月第８卷第２３期 Ｉ ａｂ Ｍｅｄ Ｃｌｉｎ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２０１１，Ｖｏ１．８，Ｎｏ．２３ 表１ ＡＦＰ测定的偏差及其可接受性 （Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｑｕａｎｔｉｔｉｖｅ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉ ａｂｏｒａｔｏｆｙ Ｍｅｔｈｏｄｓ），是临床实验室标准化协会的系列标准化文件之一。 此文件主要用于评价临床实验室定量分析方法的线性、偏差和 不精密度，可用于对自动分析仪、试剂盒、手工操作或其他临床 体外诊断方法的初步评价。ＥＰ１０一Ａ２仅用５ ｄ（可不连续）即 可完成全部测试，按照其设定的测试顺序（中、高、低、中、中、 低、低、高、高、中），便可一次性完成检测系统性能初步评估。 与其他评价方法相比，ＥＰ１０ Ａ２程序较为简便，可操作性强， 注： 表示ＣＬＩＡ８８ ＴＥａ＝３Ｓ， 表示Ｓ一０．０５， 表示ｓ一０．２６， 表 示ｓ：０．９５。 在国内大多基层医院都能实现。在本次系统性能评价测试中 测定ＡＦＰ的偏差、不确定度均在允许范围内。高、中、低３种 表２ ＡＦＰ测定的不精密度及其可接受性 浓度总均值与标定值偏差很小，在其测试范围内线性良好。多 元回归方程对５项参数（截距、斜率、交叉污染、非线性、线性漂 移）进行统计分析，从表３可看出，显示线性漂移、交叉污染的 回归参数Ｐ＞０．０５，表明两者对精密度的影响差异无统计学意 义，而截距、斜率、非线性差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１），可能 与选择标本的ＡＦＰ浓度有关，也提示在实际检测标本过程中 要注意标本浓度对线性范围的影响，对超出线性范围的标本可 对其进行稀释处理。 ］Ｉ＝ ］ ］ ］ ］通过此评价程序后，显示检测系统未见交叉污染、线性漂 移等因素对精密度有显著影响，Ｒｏｃｈｅ Ｅ４１１性能是可靠的，适 合临床实验室使用。但操作人员还可应用ＥＰ９（方法学比较）、 ＥＰ５（仪器精密度评价）、ＥＰ６（线性评价）等对该系统进行进一 步的评价。在日后的应用工作中，还需进行室内质量控制和参 表３ ＡＦＰ检测各系统性能参数分析 加室间质量评价工作，对系统的精密度、准确度进行监控。 参考文献 武学成，何林，周克元．时间分辨荧光免疫分析技术及临 注：如果ｆ＞４．６或￡＜～４．６，则 值差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０１）。 床应用ＥＪ］．医学综述，２００６，ｌ ２（７）：４３４—４３６． 周建光，杨梅．电化学发光免疫分析技术与临床应用［Ｊ］． 医疗装备，２Ｏｌｏ，２３（５）：２３ ２４． ３讨 论 ＮＣＣＬＳ．ＥＰ９ Ａ２：Ｍｅｔｈｏｄ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ａｎｄ Ｂｉａｓ Ｅｓｔｉｍａ 近年来，随着不同地区、不同国家制定疾病同一标准的迅 ｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ Ｐａｔｉｅｎｔ Ｓａｍｐｌｅｓ［ｓ］．Ｗａｙｎｅ，ＰＡ：ＮＣＣＩ Ｓ， ｝ 速开展，使得对临床检验结果具有准确性和可比性的要求越来 越强烈。实现检验结果准确和有可比性的重要手段是建立和 ２００２：５９． 张雯艳，钱丽娜，丁家华．临床实验室检测系统和溯源 保证检验结果的溯源性［５］，但要实现检验结果的溯源性和可比 性的前提是对检测系统的性能进行确认。因此，ＩＳ０１５１８９： ＥＪ］．中华检验医学杂志，２００６，３０（１）：１—３． 熊莺，孙午．酶测定中试剂和校准物对溯源的影响ＥＪ；．检 验医学与临床，２００９，６（２４）：１８９３—１８９４． ２００７｛医学实验室一质量和能力的专用要求》规定当实验室引进 新设备、新分析方法时，需要对其进行简单的、初步的性能评 价，以判断它是否符合要求。 ＥＰ１０一Ａ２文件的全称为“定量临床实验方法的初步评价” （收稿日期：２０１１—０７ ０７） （上接第２８７１页） 意事项及质量控制ＥＪ］．实用医技杂志，２００８，１５（２４）： ３２１２ ３２１ ３． 检验医学与临床，２００９，６（１２）：９８８． ［６］陈中新，徐云侠，田玲莉，等．三种抗凝剂抗凝血测定红细 胞比积结果的比较［ＩＩ］．实刚全科医学，２００７，５（１）：８２． ［３］何萌．静脉血样本放置时间对血常规测定的影响［Ｊ］．检 验医学与临床，２００９，６（１ ４）：１１５０—１１５２． ［７］徐云侠，王银娥，汪文英，等．真空管采血量不足对血液分 析仪分析结果的影响Ｉ－ｊ］．中华全科医学，２００９，７（３）：３２２— ３２３． ［４］熊立凡，刘成玉．临床检验基础ＥＭ］．４版．北京：人民卫生 出版社，２００７：４３． ［５］阳长清．血液静置时间的不同对血常规结果的影响［Ｊ］． （收稿日期：２Ｏ１１—０７—２２）