血液中酒精含量检测作业指导书.doc

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标题

血液中乙醇的检测作业指导书

批 准 人 实施日期

1．目的

检测血液中乙醇含量。 2. 适用范围

本标准适用于血液中乙醇的定性、定量分析。 3. 职责

技术负责人批准考核合格的毒物分析专业人员完成此项工作。 4. 试剂与对照品

4.1 乙醇（色谱纯 99%，Sigma）

4.2 乙醇溶液：精密称取乙醇 1.0097g 于100ml 容量瓶内，添加蒸馏水至刻度， 混匀，得10.00mg/ml 乙醇储备液，将储备液用蒸馏水稀释至 20 倍，得 0.50mg/ml 乙醇控制液，放置样品室 4℃冰箱保存，有效期为 6 个月。 4.3 叔丁醇（色谱纯 99%，Chem Service） 4.4

内标叔丁醇溶液：精密称取叔丁醇 0.5026g 于 100ml 容量瓶内，添加蒸馏

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水至刻度，混匀，得 5.00mg/ml 叔丁醇储备液，将储备液用蒸馏水稀释至

倍，得40ug/ml 叔丁醇内标工作液， 放置样品室 4℃冰箱保存， 有效期为 6 个月。 4.5 乙醇标准溶液（ Gerilliant

）

乙醇标准溶液： 10mg/dl ，20mg/dl，50mg/dl，80mg/dl ，100mg/dl ，200mg/dl， 300mg/dl

5. 血液中乙醇定性、定量的分析 5.1 样品处理

用精密移液器取样品血 0.10 mL 及 0.50 mL 叔丁醇 40μg/mL 内标工作液 2 份，各加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，置于顶空自动 进样器中加热 10 min ，待测。 5.2 气相色谱仪条件

色谱柱： DB-ALC1毛细管柱（ 30m 0.32mm 1.2 m） 柱温：恒温 40 C

检测器：火焰离子化检测器（ FID） 检测器温度： 250 C 进样口温度： 150 C 5.3 顶空自动进样分析条件

DANI顶空自动进样器 ( 配 1mL定量进样环 ) 工作条件：加热箱温度（ Oven） 65℃，定量环温度 105℃，传输线温度（ TR.Line ）110℃，样品瓶加热平衡时间 （Vial EQ.Time）10.0min，样品瓶加压时间（ Pressuriz Time）0.10min ，定量 环充满时间（ Loop Fill Time ）0.10min，定量环平衡时间 0.05min ，进样时间 （Inject Time ）1.00min 。 5.4 记录

记录检材中色谱峰乙醇及内标物的峰面积值， 填入表中， 并根据工作曲线定 量计算方程计算出样品血中乙醇的浓度。 5.5 定量结果评价

样品应同时平行测定两份， 单柱单检测器两份样品测定结果的双样相对相差 （双柱双检测器两份样品测定结果的相对偏差）若不超过

5％时（有凝血块的血

5％

样不超过 10％），结果按两份样品结果的平均值计算，双样相对相差若超过 时（有凝血块的血样超过 10％），需要重新测定。

| C

双样相对相差（ %） =

C

C1、C2 为两份样品平行定量测定的结果。

式中 C为两份样品平行定量测定结果的平均值（ C1+ C2）/ 2 ；

1

- C 2| 100