提取DNA的简易方法上海市洋径中学吴荣熙前景诱人的基因工程的本质在于DNA重组。所以,目前世界各国对此都十分重视,并努力提高本国中学生在这方面的实验水平。日本中学生已能进行DNA重组实验。我国中学生物实验水平已落后于世界发达国家。提取DNA是一个非常复杂的过程,方法也是多种多样的。但几乎每种方法都必须用目前我国一般中学不具备的离心机(至少每分钟3000转)和一些不易得到的化学药品,例如十二烷基磺酸钠、高氯酸、乙二胺四乙酸和三氯乙酸等。那未,能否不用离心机和上述一些药品来提取DNA呢?我指导了高一年级两名学生对这一问题作了初步探讨。我们参考了许多资料,设计了多组实验方案和应用了多种实验材料。经过三个月二十多次实验,从蒲公英叶、洋葱叶、黄豆根、蚕豆根、花椰菜等材料中选出从花椰菜花芽中提取DNA的简易方法。这种方法所需的药品只有八种:氯化钠、苯酚、柠檬酸钠、无水乙醇、二氧化矽、二苯胺试剂(二苯胺+冰醋酸+浓H:504),而且不必使用离心机。虽然,由于我们简化了实验器材和药品,使所提取的DNA中含有一定的杂质,但这并不影响实验结果,而且过程简单,在45分钟内可以完成。因此,这是一种在目前条件下,在中学生物实验中易于推广、效率较高的方法。一、实验原理:DNA和RNA在细胞中都和蛋白质结合,形成DNA蛋白复合体和RNA蛋白复合体。在IM的氯化钠溶液中,DNA蛋白复合体的溶解度很大,而RNA蛋白复合体溶解度很小,利用这一特点,就可以把两者分离。把分离出来的DNA蛋白复合体溶液用苯酚处理,DNA就和蛋自质分离,:蛋白质留在苯酚层内。将分离所得溶有DNA的溶液用适量的无水乙醇处理,DNA即能析出。为了防止核酸酶对核酸的降解作用,在提取过程中应加入柠檬酸钠,这是由于核酸酶的作用需要MgZ+,而柠檬酸钠作为鳌合剂可以除去Mg“占所以有抑制核酸酶的作用。在气温高于10℃时应使用冰水浴。DNA中的脱氧核糖与二苯胺酸性溶液反应生成蓝色化合物,可以用来检验DNA。二、材料和用具:(一)用具1研钵,2烧杯,3兰角漏斗,4铁架台,5玻璃棒,6脱脂棉或细纱,.三角架,布7量筒,石棉网;加酒精灯,,1吸管21试管。(二)材料1新鲜花椰菜花芽5克,2.。15M柠檬酸钠溶液10毫升,3IM氯化钠溶,,液53毫升4苯酚饱和液01毫升5无水乙醇6。毫升,6标准DNA母液(15毫克/10毫升),l毫升7二苯胺试剂(l克二苯胺溶于10毫升冰醋酸中+257毫升H:50`)6毫升,8二氧化矽02克。三、实验步骤:取花椰菜花芽5克放入研钵,加入。51M柠檬酸钠溶液01毫升,二氧化矽。2克,将菜花迅速研成糊状。往糊状物里加入IM氯化钠溶液03毫升,搅拌,使两者均匀接触,将研磨液倒入小玻璃漏斗中进行过滤,漏斗的基部应塞少量脱脂棉或细纱布。弃去滤渣,往滤液中加入苯酚饱和溶液01毫升,搅拌后,过滤。弃去滤渣,往滤液中加入同体积的无水乙醇,用玻璃棒不断搅拌,这时应有丝状物析出,业缠绕在玻璃棒上。如无丝状析出,则表明DNA已被降解。四、实验结果的鉴定:将所得丝状物溶解在1毫升IM氯化钠溶液,装入3号试管,如丝状物少,可将最后步置数小时后,取沉淀鉴定。将1毫升蒸馏水,1毫升标准DNA溶液分1号和2号试管中。在三支试管中,各加2毫二苯胺试剂,放入沸水浴中01分钟后观测结。(表格见左页)。灯.中骤所得溶液静装升果试论中学高级教师谈宝珍马炜梁在不久前首次教师专业技术职务评聘中,不少中学生物教师被评聘为中学高级教师。中学高级教师相当于高校副教授,只是不像高校那样强调外语和学报发表的论文,而十分重视教学效果,这是由中学的任务决定的。教师专业技术评聘的指导思想是要有利于调动教师教书育人的积极性。对于高级教师,在做好班主任作、上好区县级的公开课、指导课外活动小组与带教青年教师等方面都有相当的要求。因为只有通过这些才能看出在履行教书育人职责方面的基本情况。高级教师应具有相当的科学研究能力。中学教师的科研主要是指中学教育、教学某一方研究,不少教师围绕发展学生智力、调动学生学习积极性、减轻学生负担等方面写出了有材料有分析的论文,这是多年教学实践的宝贵总结。有的教师结合教材分析,结合复习和考试方法的改革,结合开展课外活动,农村中学结合以培养农业生产的能人为目标,组织多种经济作物的栽培、食用菌与药用菌的培养等科技活动写出理论联系实际的具有一定水平的经验总结和科研报告,这些都是成功之作。而一些叙述性的工作总结,一般的教案或教材分析、小报上的科普性知识性小文章,就某一问题进行呼吁的短文等等就较难列为科研成了地老虎、菜白蝶等幼虫和成虫,进行人工,分别得到了它们的卵或蛹,制作了精美完整的地老虎、菜白蝶等昆虫生活史标本件,了市昆虫标本比赛,荣获标本比赛一等奖。牛顿说:“没有大胆的猜想,就作不出伟现”。培养和发展学生的创造性思维,,应该是我们的课堂教学,特是课外活动中,值得探讨和重视的核心问题。.16`果。在正式出版的刊物上发表的论文因为已经通过了一定的审查,容易得到认可,因此好的作品应该努力争取发表。由于种种原因,教育科研似乎只是少数专家的事,大多数教师忙碌于日常事务之中,充其量只能进行一些教学方法的小改小革,不少教师对于教育科研的选题,方法,途径,总结的规格和教育统计数据处理等现代方法的运用还知道得不多,因此有关的师范院校和研究室应举办一些讲座,以提高中学教师进行教育科研的能力。在教学(教育)效果衡量上,不少教师以高考、会考、统测的成绩为依据,但由于许多影响因素(学校所处的地段、学生的素质、班级的好坏,班主任是否得力等),考分也只能作为参考,何况在这方面进行攀比,在人才未能充分流动的今天,对同行之间的团结,客观上有不利的影响,至少在目前业不值得提倡。教学效果还可以从其他方面得到反映。例如有的教师历年来吸引了不少学生选择有关专业作为终身的志愿;有些被带教的青年教师富有激情地叙述如何在老教师的辛勤帮助下很快地成长起来,能上出高质量的公共课;具有较强的答疑咨询能力,能在课外活动中培养学生的创造能力,这些都应视作教学效果显著的标志。从目前已评上高级教师的教师情况看,他们一般都是在大学阶段学得活、学得扎实、业务功底过硬、具有相当的组织能力、在教育岗位上不断钻研、不断进取的教师。教师专业技术职务评聘在我国还是首次,今后将会经常性地开展,让我们以实际工作成绩迎接评聘吧!「}试管编号}2号{。号}蒸馏水王毫升标准DNA溶液1毫升升溶有所得丝状物的溶液1毫升升二苯胺试剂2毫升升2毫升升放沸水浴中川分钟后现象蓝}变。工面的科学捉饲养大的发参加塑造创造型人才别
